B、C基因型乙肝病毒在HEK-293T细胞中免疫炎症反应比较研究

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目的:通过观察比较B、C基因型乙肝病毒感染HEK-293T细胞后分泌细胞因子产生的免疫炎症反应差异,作为B和C基因型乙肝病毒和临床病情是否相关的参考,从而对乙肝基因型与临床相关性的发生机制作补充,为临床治疗提供方向。方法:随机选取2015年1月至2015年9月至南昌市第九医院门诊和住院就诊的慢性乙型肝炎患者(HBV-DNA均为阳性)的血清标本254例。性别、年龄不限。并排除其他合并的疾病,且未进行性抗病毒治疗。诊断符合2015年中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会联合制订的慢性乙型肝炎防治指南。采用多对型特异性引物巢式PCR法鉴定并筛选出血清标本中的B、C两种基因型,随机选取B、C基因型15例。分别扩增B、C基因型血清标本中HBV病毒的s和c基因片段。采用克隆技术构建含有s和c基因片段表达绿色荧光蛋白的重组真核表达质粒,转染至HEK-293T细胞中,检测该细胞中IL-1β、TNF-α等的细胞因子分泌的水平。分析各组间的临床特征、IL-1β、TNF-α水平的差异。采用SPSS20.0软件进行统计学分析。P<0.05具有统计学意义。结果:转染B基因型的s片段细胞中IL-1β水平为(143.89±46.48)pg/ml、TNF-α水平为(7.97±1.03)pg/ml,c片段细胞中IL-1β水平为(253.62±65.12)pg/ml、TFN-α水平为(8.65±1.07)pg/ml;C基因型的s片段中IL-1β水平为(40.96±29.29)pg/ml,TNF-α水平为(4.22±0.56)pg/ml,c片段中IL-1β水平为(35.78±19.31)pg/ml,TNF-α水平为(3.39±0.33)pg/ml。结论:乙肝病毒B基因型中基因片段在体外HEK-293T中的免疫炎症介质表达量明显高于C基因型。这或许是一个与临床致病性不同有关的因素。能从某种程度上证实两种基因型在体外细胞免疫反应过程中的不同。这为我们提供了另一个慢性乙型肝炎的研究角度。
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