肝细胞是一种高度特化的极性细胞,肝细胞极性改变与肝炎、肝硬化及肝癌等疾病密切相关。胞内蛋白的囊泡运输在肝细胞极化过程中起重要作用。囊泡蛋白分选蛋白VPS33B（Vacuolar Protein Sorting protein 33B,VPS33B）是参与囊泡运输的重要分子。已有报道VPS33B基因突变会引起关节挛缩-肾功能不全-胆汁淤积（Arthrogryposis-Renal dysfunction-Cholestasis,ARC）综合征,该疾病临床症状包括全身的发育受阻及多个脏器的功能障碍。在ARC综合征病人的肝脏中,肝细胞极性出现紊乱,部分病人有肝炎发生,进一步恶化有发生肝癌的可能性。但是,目前关于VPS33B对肝细胞极性的影响及其在肝炎肝癌等肝脏疾病中的作用和相关机制并不明确。我们对肝细胞性肝癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）病人肝脏中VPS33B的定位和表达进行检测,首次发现随着肝癌恶性程度的增加,VPS33B的表达逐渐减少,而定位并没有出现异常。利用CD137介导的肝炎肝癌小鼠模型和二乙基亚硝胺（DEN）诱导的肝癌小鼠模型进行分析,得到了相似的结果,即两种小鼠模型的肝癌组织中VPS33B表达均有不同程度的降低。这些结果提示VPS33B可能参与了肝炎、肝癌的发生发展过程。为了研究VPS33B在肝脏中的功能,我们构建了肝脏特异性敲除Vps33b小鼠模型（Vps33bf/f/f Alb-Cre+）,选择小鼠年龄1个月、4个月、8个月和12个月共4个时间点进行观察。肝脏特异性敲除Vps33b小鼠年龄从1个月开始,血浆胆固醇水平出现异常,包括总胆固醇（Total Cholesterol,TC）、高密度脂蛋白（High Density Lipoprotein,HDL）和低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein,LDL）均高于对照组（Vps33bf/f/f Alb-Cre-）。从4个月开始,,肝脏特异性敲除Vps33b小鼠与肝损伤相关的谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）和谷草转氨酶（Aspertate aminotransferase,AST）等酶学指标高于对照组,随着年龄的增加,这种差异更加明显。对参与肝细胞胆固醇转运的相关分子进行定位和表达分析,发现在Vps33bf/f/f Alb-Cre+小鼠模型中,一些肝细胞膜表面分子极性分布发生紊乱,参与将乳糜微粒胆固醇转运至胞浆内的分子载脂蛋白E（Apolipoprotein E,APOE）在肝细胞血窦侧分布增多,其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白（Low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1）表达有轻度下降。由于ARC综合征病人胆管侧有部分转运体分布异常,我们对Vps33bf/f/f Alb-Cre+小鼠模型的肝细胞胆管侧相关分子进行分析,发现胆管侧分子ABCG8于胞浆中弥散分布,而和它共同组成异二聚体的另外一种分子ABCG5却没有发生定位和表达的异常。Vps33bf/f/f Alb-Cre+小鼠发育到12个月之后,小鼠肝脏发生了更为严重的病变,其相对肝脏重量升高,肝脏肿大并伴有炎性细胞浸润和多个肿瘤结节发生,肝癌发生率为42.9%。参与肝细胞极化的粘附连接分子E钙黏素（E-cadherin）表达水平降低,这与ARC综合征病人相似。VPS33B在胎儿和成人的多种组织中广泛表达,提示VPS33B可能在不同的组织细胞中通过与不同蛋白分子结合而发挥重要的功能。我们通过免疫共沉淀结合质谱分析技术,在人肝癌细胞系HepG2中发现VPS33B与VPS16B、SEC22B和FLOT1存在相互作用,这些分子可能以复合体的形式通过调控肝细胞内蛋白的囊泡运输而影响肝细胞的极化过程。通过研究Vps33b敲除对肝脏功能的影响,发现并证明了VPS33B在肝炎肝癌中的作用,初步揭示了VPS33B可能以复合体的形式参与肝细胞膜表面分子极性分布,影响肝细胞胆固醇转运及引发肝炎肝癌的分子机制,为进一步深入研究VPS33B的功能提供了重要线索,为理解肝细胞性肝癌的发生机制提供了新的角度。