本文主要从以下几个部分展开论述：　　第一部分 PI3K在L-选择素信号转导中的作用研究　　目的：研究PI3K在L-选择素信号转导中的作用，探讨其对细胞骨架的影响。　　方法：（1）将培养的Jurkat细胞，分为对照组（Control组）、实验组（交联干预组）。Control组为静止状态细胞，即L-S与DREG56非交联组（0min组）；实验组按交联作用时间3min、5min、10min分成三个亚组。检测对照组和交联3、5、10min后细胞内的PI3K蛋白含量和磷酸化水平。　　（2）将培养的Jurkat细胞，分为对照组（静止细胞）、交联组（L-S与DREG56交联细胞）和干预组（交联前使用PI3K的特异性抑制剂LY294002干预细胞）三组，通过免疫荧光强度检测三组细胞内肌动蛋白（F-actin）聚合情况。　　结果：（1）①PI3K蛋白水平：DREG56与L-S交联3 min、5 min、10min后， PI3K的蛋白含量在3min时明显升高，与对照组相比有显著差异（P＜0.01）；5min和10min时PI3K的蛋白含量明显下降，与3min相比有显著差异（P＜0.01），与对照组比较无明显变化，无统计学差异（P＞0.05）。②PI3K磷酸化水平：DREG56与L-S交联3 min、5 min、10 min后，PI3K的磷酸化水平在3min、5min时都有升高，且3min时升高更明显，两组与对照组相比差异有显著意义（P＜0.01，P＜0.05）；在10min时PI3K的磷酸化水平下降，与对照组、3min及5min组比较有显著差异（P＜0.01）。　　（2）使用倒置荧光显微镜观察对照组、交联组和干预组细胞内F-actin平均荧光强度，交联组的平均荧光强度明显大于对照组和干预组，与对照组、干预组比较有显著统计学差异（P＜0.01）；对照组与干预组比较无明显变化，无统计学差异（P＞0.05）。　　结论：(1)L-选择素与其单克隆抗体DREG56交联诱导PI3K活化。　　(2)活化后的PI3K可以调控细胞骨架变化。　　第二部分 PI3K与ZAP70在L-选择素信号转导中关系的研究　　目的：在PI3K介导的L-选择素信号转导事件中，Zap70是否为PI3K的上游信号分子。　　方法：（1）将培养的Jurkat细胞分为对照组（Control组）、实验组（交联干预组）。Control组为静止状态细胞，即L-S与DREG56非交联组（0min组）；实验组按交联作用时间3min、5min、10min分成三个亚组，检测对照组和交联3min、5min、10min后细胞内的ZAP70蛋白含量和磷酸化水平。　　（2）将培养的Jurkat细胞，分为PI3K组和ZAP70组。PI3K组：DREG56与L-S交联前，用ZAP70的特异性抑制剂Piceatannol与Jurkat细胞孵育30分钟，之后DREG56与L-S交联3分钟检测PI3K蛋白含量和磷酸化水平；ZAP70组：DREG56与L-S交联前，用PI3K的特异性抑制剂LY294002与Jurkat细胞孵育30分钟，之后DREG56与L-S交联3分钟检测ZAP70蛋白含量和磷酸化水平。　　结果：（1）①ZAP70蛋白水平：DREG56与L-S交联3 min、5 min、10min后， ZAP70的蛋白含量在3min、5min、10min时均有升高且3min时达峰值，有显著的统计学差异（P＜0.01，P＜0.05）。②ZAP70磷酸化水平：DREG56与L-S交联3 min、5 min、10 min后，ZAP70的磷酸化水平在3min、5min时升高且3min时升高更明显，有显著的统计学差异（P＜0.01）；在10min时ZAP70磷酸化水平显著下降，与对照组、3min及5min组比较有显著差异（P＜0.01）。　　（2）①DREG56与L-S交联前，用ZAP70的特异性抑制剂Piceatannol与Jurkat细胞孵育30分钟，之后DREG56与L-S交联3分钟检测PI3K蛋白含量和磷酸化水平：PI3K蛋白含量与对照组比较无差异，无统计学差异（P＞0.05）；PI3K磷酸化水平与对照组比较显著降低，有显著统计学差异（P＜0.01）。②DREG56与L-S交联前，用PI3K的特异性抑制剂LY294002与Jurkat细胞孵育30分钟，之后DREG56与L-S交联3分钟检测ZAP70蛋白含量和磷酸化水平：ZAP70蛋白含量和磷酸化水平与对照组比较都有显著降低，有显著统计学差异（P＜0.01）。　　结论：PI3K可能在L-选择素信号转导事件中是ZAP70的上游信号分子，而Zap70也可能通过LAT底物影响PI3K的活性。