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目的:检测不同浓度二甲双胍及二甲双胍联合AMPK印制剂Compound C对人肝胆管癌RBE细胞的增殖、凋亡和周期分布的影响,研究AMPK及mTOR在胆管癌RBE细胞中的活性变化,初步探讨其可能的分子生物学机制。方法:1.MTT检测不同浓度二甲双胍对人肝胆管癌RBE细胞增殖的影响:体外培养胆管癌RBE细胞,MTT法检测浓度为0、5、10、20、30mmol/L的二甲双胍及各组(对照组、20mmol/L二甲双胍、20umol/L Compound C组、20umol/L Compound C+20mmol/L二甲双胍组)作用于RBE细胞后24小时、48小时、72小时的存活率;2.流式细胞术检测不同浓度二甲双胍干预后细胞周期分布和细胞凋亡率:流式细胞术检测浓度为0、5、10、20、30mmol/L的二甲双胍及各组(对照组、20mmol/L二甲双胍、20umol/L Compound C组、20umol/L Compound C+20mmol/L二甲双胍组)作用于胆管癌RBE细胞48小时后各组细胞周期分布和细胞凋亡率;3.检测不同浓度二甲双胍干预后AMPK、p-AMPK、mTOR、 p-mTOR的变化:Western Blot检测各组浓度为0、5、10、20、30mmol/L的二甲双胍及各组(对照组、20mmol/L二甲双胍、20u mol/L Compound C组、20umol/L Compound C+20mmol/L二甲双胍组)作用于胆管癌RBE细胞48小时后各组细胞中AMPK、磷酸化的AMPK(Thr172)和mTOR、磷酸化的mTOR(Ser2448)的变化。结果:1.MTT法结果显示:随着二甲双胍浓度的增加,各组细胞存活率明显降低,10.20、30mmol/L二甲双胍48h组存活率明显低于24小时组,二甲双胍联合Compound C作用时,与对照组间无显著差异;2.流式细胞术结果显示:随着二甲双胍浓度的增加,各组细胞G0/G1细胞逐渐增加,S期细胞逐渐减少,早期凋亡率逐渐增加,二甲双胍联合Compound C作用时,与对照组间无显著差异;3. Western Blot结果显示:随着二甲双胍浓度的增加,各组间AMPK、mTOR的表达量无显著性差异,而随着二甲双胍浓度的增加,p-AMPK的表达量随之增加,p-mTOR的表达量则随之减少。在二甲双胍联合Compound C组,p-AMPK及p-mTOR的表达量则介于对照组与二甲双胍组之间。结论:1.二甲双胍可以抑制胆管癌RBE细胞的增殖,将RBE细胞阻滞于G0/G1期,并诱导凋亡;2. Compound C可以拮抗二甲双胍对胆管癌RBE细胞增殖的抑制及其他作用;3.二甲双胍可能通过激活AMPK/mTOR信号通路抑制胆管癌细胞RBE的增殖。