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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的自身免疫病。传统改善病情抗风湿药副作用大,作用有限,生物制剂价格昂贵,亦存在无效或耐药现象,且长期使用的潜在副作用尚有待观察。上世纪70年代,我院首先应用传统中药三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)治疗急性早幼粒细胞自血病并取得显著疗效,此后,As2O3在临床多领域的作用逐渐被认识与发现。最近有研究显示,应用As2O3治疗的狼疮鼠病情缓解,提示As2O3在自身免疫病治疗中可能具有潜在应用前景。本课题组已在国际上率先发现并证实As2O3能有效缓解RA模型鼠的关节炎症,抑制滑膜血管增殖,但作用机制尚不完全清楚。RA患者血浆和滑膜组织中有大量活化的转化生长因子-β(transforming growthfactor-β,TGF-β),TGF-β在RA发病过程中起到重要作用。本研究拟研究TGF-β1对RA“中心犯罪”细胞滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synovial cells,FLS)的作用,并通过研究As2O3对RA FLS中TGF-β/TGF-β受体通路及其下游分子结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的影响,探讨As2O3治疗RA的作用机制。 方法:体外培养RA FLS,经不同浓度的As2O3处理(0.5μmol/L,1μmol/L,2μmol/L,4μmol/L,8μmol/L)24小时后,用实时定量-聚合酶链式反应(real-timequantitative-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞内CTGF mRNA表达水平。用TGF-β1刺激RA FLS,用RT-PCR和免疫印迹法(western blot)检测TGF-βRI和CTGF的mRNA和蛋白表达。用TGFβⅠ型受体(TGF-βRI)拮抗剂LY364947和As2O3干预,观察它们对TGFβ诱导的RAFLS中TGF-βRI和CTGF基因和蛋白表达的影响。 结果:RAFLS可表达少量的TGF-βRI和CTGF,As2O3呈浓度依赖性抑制RA FLS CTGF mRNA表达。TGF-β1刺激导致其Ⅰ型受体TGF-βRI的mRNA和蛋白表达增加,同时CTGF的mRNA和蛋白表达也明显增加。TGF-βRI拮抗剂LY364947能有效抑制TGF-β1诱导的TGF-βRI mRNA和蛋白表达,并抑制CTGF基因表达。2μmol/LAs2O3和4μmol/L As2O3均能有效抑制TGF-β1诱导的TGF-βRI和CTGF mRNA表达,4μμmol/LAs2O3对TGF-βRI和CTGF蛋白表达的抑制作用更显著。 结论:TGF-β诱导能促进RAFLS中TGF-βRI和CTGF的mRNA和蛋白表达。AS2O3呈剂量依赖性下调RA FLS CTGF mRNA水平,并能抑制TGFβ刺激导致的TGF-βRI和CTGF表达。