糖尿病研究的蝙蝠动物模型和SLC2A2基因研究

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蝙蝠属于哺乳动物纲翼手目,物种数量占哺乳动物的五分之一。食果蝙蝠较其它蝙蝠具有更好的维持糖稳态、胰岛素敏感性和胰岛素降血糖能力,食虫蝙蝠有在冬眠前期快速增加体重、储存大量脂肪和较强的白色脂肪棕样化能力,因此蝙蝠可以成为人类糖尿病研究和治疗中非常好的动物模型。身体质量指数和血糖是常用的糖尿病研究方法。为了建立糖尿病研究的蝙蝠模型,本文探索并建立了蝙蝠的身体质量指数(body mass index,BMI)和前臂长质量指数(forearm mass index,FMI),并对这两个指数与血糖水平的相关性、蝙蝠在急性糖耐量实验中的表现及其分子机制进行了研究。本研究建立了149种蝙蝠的BMI指数和860种蝙蝠的FMI指数。相比较而言,食虫蝙蝠拥有更低的BMI和FMI,而食果蝙蝠的BMI和FMI更高,杂食蝙蝠、吸血蝙蝠和食肉蝙蝠的BMI和FMI介于食虫蝙蝠和食果蝙蝠之间,反映了食果蝙蝠比食虫蝙蝠有更高的正常体重基准。通过比较,本文发现人类BMI标准不适合蝙蝠,为此需要建立蝙蝠自身超重和肥胖的判断标准,通过对杂食蝙蝠在以昆虫或水果为主要,甚至唯一食物来源时,其BMI和FMI两指数和血糖相关性以及葡萄糖耐量实验将有助于该标准的确立。随后对BMI和FMI指数与蝙蝠血糖的种间相关性研究,发现BMI和FMI指数与血糖有种间水平的负相关性,即拥有较高BMI和FMI值的蝙蝠有较低的血糖水平,而拥有较低BMI和FMI的蝙蝠血糖较高,这与种内的BMI与血糖水平的正相关性不同。针对这种特别的现象,本文又对蝙蝠的急性糖耐量实验进行了研究,在对食果的棕果蝠和食虫的大蹄蝠的2克葡萄糖耐量实验中,棕果蝠表现出了更低的空腹血糖、更快速地到达血糖峰值,更快速地恢复血糖水平到正常范围和更小的血糖曲线下面积的特点,反映了食果蝙蝠比食虫蝙蝠更强的维持糖稳态的能力和胰岛素降低血糖的能力。血糖可以通过葡萄糖运输蛋白(GLUT)被分别吸收进入肝脏、肌肉和脂肪组织,从而降低血糖实现维持糖稳态的能力。SLC2A2基因的编码蛋白(GLUT2)是参与调控葡萄糖进出肝脏的关键蛋白。为了研究其在蝙蝠维持糖稳态和胰岛素降低血糖过程中的作用,本文进一步对蝙蝠SLC2A2基因在分子进化、转录和翻译水平的表达进行了研究。其中,对蝙蝠SLC2A2基因的分子进化研究发现,无论是食果蝙蝠、食虫蝙蝠,还是其各自的祖先进化枝,都未检测到正选择作用信号。然而,在SLC2A2基因启动子区,所有检测的食果蝙蝠都缺失了一段长度为11 bp的核苷酸序列,而该段序列被预测为转录抑制因子ZNF354C的识别结合位点。随后的荧光定量PCR和蛋白质杂交实验证实缺失该段序列的食果蝙蝠SLC2A2基因在转录和翻译水平,都比仍然存在该段序列的食虫蝙蝠有更高的表达水平,这可能导致了食果蝙蝠和食虫蝙蝠糖代谢能力的差别。
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