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实验目的：研究多西紫杉醇对人肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒性及放射增敏作用,为肝癌的治疗提供实验依据。实验方法：(1)将复苏的人肝癌细胞系SMMC-7721进行培养、传代,取对数生长期的细胞进行实验。(2)MTT比色法测定多西紫杉醇对肝癌细胞的生长抑制作用。(3)光学倒置显微镜下观察经多西紫杉醇处理细胞不同时间后的细胞形态学变化。(4)流式细胞仪检测并分析药物对细胞周期分布、凋亡的影响。(5)应用集落形成法观察药物对细胞的放射增敏作用。(6)流式细胞仪检测经药物及伽马射线作用后细胞内活性氧水平的变化。实验结果：(1)人肝癌细胞SMMC-7721经复苏、培养、传代3-5天后,细胞生长状态良好,并进入了对数生长期。(2)MTT比色法检测结果显示：多西紫杉醇对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖有抑制作用,并呈现出药物浓度依赖性,药物的半数抑制浓度(IC50)为2.199nmol/ml,lC10为0.439nmol/ml。(3)光学倒置显微镜观察可见：以1C10(0.439nmol/ml)的药物浓度作用细胞不同时间后,随药物作用时间的延长,光镜下可见细胞系统的连续性变化,从细胞间隙增宽、贴壁状态及贴壁时特有的多形性变差、细胞出现回缩倾向.到细胞内空泡形成、不能贴壁生长、最终含大量空泡的细胞死亡脱落。(4)流式细胞仪对细胞周期分布及凋亡的测定结果显示：细胞经浓度(0.005nmol/ml)明显低于IC10(0.439nmol/ml)时的多西紫杉醇作用细胞24小时后,即可对细胞周期产生明显的G2/M期阻滞,作用48小时后可诱导细胞凋亡,而药物浓度增高至50nmol/ml作用24小时后即可诱导细胞发生凋亡,呈现出药物浓度-作用时间依赖性。(5)集落形成实验的结果显示：多西紫杉醇对人肝癌细胞有放射增敏作用,单纯用药、单纯照射、联合组1、联合组2的细胞存活分数均下降,并呈现出药物浓度-照射剂量依赖效应：其中联合组对细胞存活分数的影响尤为显著,与单纯用药或单纯照射相比较均有显著统计学差异(P<0.01),且其所致的生物效应大于单纯用药及单纯照射的总和.放射增敏比SER均大于1,其中联合组1为1.03,联合组2为1.26。(6)流式细胞仪对细胞内活性氧测定结果显示：单纯用药组、单纯照射组、联合组的细胞内活性氧水平均明显升高,并呈现出照射剂量依赖效应,其中联合组的活性氧水平增高更为明显,与单纯照射组及单纯用药组相比有显著差异(P<0.01),且所致的生物效应大于单纯用药组及单纯照射组的总和。结论：多西紫杉醇对人肝癌细胞SMMC-7721有毒性作用及放射增敏作用,其机制可能与引起细胞G2/M期阻滞(放射增敏时相)有关,而在增敏条件下细胞内活性氧水平明显增高,可能对于增强细胞的放射敏感性及诱导凋亡方面亦起到了一定的促进作用。