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本文针对草莓炭疽病病原菌的生物学特性、致病因子活性、侵染机制和病害侵染循环规律进行了系统的比较研究。
1.对草莓炭疽病的田间发病情况进行了初步调查对丹东草莓主产区的20个草莓品种炭疽病发生情况调查结果表明:田间发病率在86%~100%。一些欧美品种抗病性较强,病情较轻,其中来自美国的哈尼和BF6尤为突出。而一些日本品种抗性较弱,其中以99号、幸香的抗病性最弱。
2.初步鉴定明确了采集、分离菌株的分类归属对采自辽宁省丹东市振安区和东港市、抚顺草莓生产基地、抚顺市清原县、沈阳市于洪区、沈阳农业大学农大草莓园的标样进行分离,得到28个草莓炭疽病菌菌株经鉴定,基本分为A、B、C、D、E、F 6个类型。分属为炭疽菌属的4个种:Colletotrichumgloeospoioides、C.fragariae、C dematium和C. acutatum。其中菌株A、E、F同属于Cgloeospoioides,E、F在培养过程中产生有性态,经鉴定属于子囊菌门球壳目小丛壳属Glomerella(Stonem)Spauld.et Schr.。
3.对草莓炭疽病菌的生物学特性进行了较系统的比较研究6株菌株在PDA和PSA培养基上菌丝生长情况均为最佳;菌株B、E在酵母浸膏培养基上较易产孢其余菌株在PDA和PSA培养基上较容易产孢;蔗糖、葡萄糖、甘露醇糖、果糖对6菌株的菌落生长具有较明显的促进作用;氮源中以蛋白胨对各菌株菌落生长及产孢的促进作用最为明显。各菌株生长的适宜温度为20~30℃,所有菌株在5℃和40"C均不能生长,菌株A、D在35℃即不能生长。菌株D、F产孢的适温为15~30℃,其余菌株产孢的适温为20~30℃;光照对菌株A、B、C、E的菌落生长影响不大,菌株D、F在光照条件下有利菌丝生长,除菌株D在光暗交替条件下产孢量最大外,其余5个菌株光照利于其产孢;各菌株生长的适宜pH值为4~7,一般5为最适pH值。产孢的适宜pH值为4~8。
6株菌株分生孢子萌发对光照的反应不敏感,对温度及酸碱性的适应性比较广泛,温度在10~40℃范围均可萌发,pH在3~11范围内均可以萌发,适宜pH范围为4~7;供试的5种碳源对各菌株孢子萌发均有一定的促进作用。6株菌株分生孢子致死温度较高,均在55℃以上、10min。
4.初步测定了草莓炭疽病菌的致病特性草莓炭疽病菌细胞壁降解酶活性测定结果表明:6株菌株间,滤纸酶的活性差异较小且活性最低;β-葡萄糖苷酶、羧甲基纤维素酶、聚甲基半乳糖醛酸酶的活力较大,且各菌株间差异较大。菌株E、F的β-葡萄糖苷酶、羧甲基纤维素酶、聚甲基半乳糖醛酸酶的活力均明显高于其它菌株。
采用2种方法提取草莓炭疽病菌毒素结果表明:硫酸铵分级沉淀法提毒素量小,结果不理想;有机溶剂萃取该毒素的效果相对较好。对草莓炭疽病菌毒素生物活性测定结果表明,毒素针刺草莓叶片可产生黑色病斑,说明毒素对叶片细胞具有致病破坏作用。毒素高浓度下致病力强,表明其对叶片的损伤程度与浓度具有密切的关系。对毒素的透析结果证明,草莓炭疽病菌所产生的致病毒素为一种大分子化合物。热稳定性试验表明草莓炭疽病菌致病毒素具有较高的热稳定性。毒素中蛋白质含量测定结果表明,6株菌株所产的毒素中蛋白质含量与其致病力没有明显相关性。
5.初步探讨了草莓炭疽病的侵染循环基本规律病害侵染循环研究结果表明,病组织标样在4℃恒温贮藏条件下,20个月后病菌仍可存活,表明病原菌越冬存活能力较强;直接种草莓叶片15d,尚未出现症状,表明病原菌在健康草莓组织中具有较长时间的潜伏侵染能力。所以防止幼苗带菌是草莓炭疽病防治中至关重要的一步。
6.进行了杀菌剂抑菌效果室内测定应用9种杀菌剂室内药剂抑菌测定结果表明,50%退菌特可湿性粉剂1000倍液和10%世高可湿性粉剂1000倍液的抑菌效果较好,对所有菌株的抑制率均在87%~100%。为农业生产上草莓炭疽病的化学防治提供了一定理论依据。