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肿瘤多药耐药是导致癌症患者化疗失败的主要原因之一，而多药耐药的重要机制则是肿瘤细胞内ABC转运蛋白的高表达，转运蛋白将药物排出细胞从而降低胞内抗癌药物的有效浓度，最终导致肿瘤细胞对结构和作用机制不相关的多种抗癌药物产生耐药。因此寻找低毒、高效的多药耐药逆转剂是提高肿瘤治疗效果的必要途经。 本研究立足于本实验室已有的肿瘤多药耐药筛选机制，在多药耐药肿瘤细胞模型筛选及评价新型肿瘤多药耐药逆转剂J196-9-4和J196-10-1的逆转活性，进而初步探索其逆转机制。本实验选用人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药细胞株MCF-7/ADR作为多药耐药逆转剂筛选模型，利用细胞毒检测法（SRB法）检测细胞对药物的敏感性;荧光染料外排法评估ABC转运蛋白的外排活性;实时定量PCR法检测ABC转运蛋白ABCB1在转录水平上的表达变化;ATP酶活性分析J196-9-4和J196-10-1与ABCB1的相互作用机制。 实验结果: J196-9-4能够逆转MCF-7/ADR细胞对柔红霉素、长春新碱和拓扑替康的耐药性，且呈剂量依赖性。其中，5μM J196-9-4逆转多药耐药细胞对柔红霉素、长春新碱和拓扑替康的逆转率分别为2.91倍、8.65倍和3.81倍;10μMJ196-9-4逆转多药耐药细胞对柔红霉素、长春新碱和拓扑替康的逆转率分别为10.98倍、9.82倍和7.09倍;J196-9-4与荧光染液Rho123共同孵育耐药细胞系MCF-7/ADR，能有效提高细胞内荧光染液的积累量，呈时间浓度依赖性;J196-9-4对ABCB1转录水平无明显影响;J196-9-4经ATP酶活性检测，儿96-9-4可激活ABCB1的ATP酶活性且呈浓度依赖，初步判断其为ABCB1转运蛋白的底物。 5μMJ196-10-1逆转多药耐药细胞对柔红霉素、长春新碱和拓扑替康的逆转率分别为6.94倍、14.88倍和5.62倍;10μM J196-10-1逆转多药耐药细胞对柔红霉素、长春新碱和拓扑替康的逆转率分别为53.91倍、219.63倍和7.44倍;J196-10-1与荧光染液Rho123共同孵育耐药细胞系MCF-7/ADR，能有效提高细胞内荧光染液的积累量，且呈时间浓度依赖;J196-10-1对ABCB1转录水平无明显影响;J196-10-1经ATP酶活性检测，J196-10-1可激活ABCB1的ATP酶活性且呈浓度依赖，ATP保护实验结果显示J196-10-1浓度依赖性激活ABCB1的ATP酶活性，初步判断其为ABCB1转运蛋白的底物且结合于ABCB1转运蛋白的跨膜结构域。 实验结论:J196-9-4和J196-10-1均能够有效逆转MCF-7/ADR细胞的耐药，其作用机制可能是竞争性抑制药物的外排和抑制相关转运蛋白的表达而提高细胞内的抗癌药物积累量。J196-9-4和J196-10-1在肿瘤多药耐药临床研究与治疗中有重要意义和作用。