动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是导致多种缺血性疾病最常见的原因，斑块的不稳定性是急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)等多种心脑血管疾病的病理生理基础，免疫反应和炎症机制共同参与了AS的发生发展[1]。近十年来，人们对动脉粥样硬化和急性心脑血管事件的研究取得了显著进展，并认识到炎症免疫反应的重要意义。通过干预免疫过程来防治动脉粥样硬化的途径，现主要集中在免疫疫苗、免疫调节剂和细胞因子、细胞表面阻断剂的研究。CTLA-4Ig融合蛋白作为T淋巴细胞活化第二信号的阻断剂，已经引起研究者的关注，目前研究主要集中在移植免疫和自身免疫性疾病方面，在心血管领域方面的研究极少。为了探索预防和延缓AS发生发展的新途径，我们观察CTLA-4Ig对小鼠动脉粥样硬化发生发展的阻抑作用，为心脑血管疾病的临床治疗开辟新途径。 研究目的： 1.观察CTLA-4Ig融合蛋白对载脂蛋白E基因缺陷小鼠(apoE-/-)动脉粥样硬化病变发生发展的抑制作用。 2.探讨CTLA-4Ig融合蛋白抑制动脉粥样硬化发生发展可能的作用机制。 材料与方法： 1.实验动物 10周龄apoE(-/-)小鼠，雄性，由北京大学医学部实验动物中心提供(合格证号：SCXK(京)21060008)，随机处死两只，取从主动脉根部至髂总动脉分叉处全长主动脉石蜡包埋后病理切片HE染色，镜下见主动脉血管内膜光整，无动脉粥样硬化病变。剩余小鼠高脂饮食适应性喂养4周，随机处死5只做为参照组，病理切片观察主动脉已形成早期脂质条纹，余20只小鼠纳入实验，将动物按体重编号后，按随机数字表分为CTLA-4Ig组、PBS组、IgG组及对照组，每组各5只。分别给予PBS(100 μ L/次)、Rat—IgG(10 μ g/次)、CTLA-4Ig(10 μ g/次)腹腔注射，2次/周，共8周。对照组无任何干预，同其余三组一起继续高脂饲料喂养8周。 2.实验方法 实验8周后，用1％戊巴比妥腹腔注射麻醉小鼠，固定于解剖板上，打开胸腔、腹腔，分离自主动脉根部至髂动脉分叉处全长主动脉，用眼科镊分离周围脂肪组织及结缔组织，将胸主动脉上半段切成3—4mm的动脉段，冰冻切片苏丹Ⅲ染色，后将剩余主动脉放入10％福尔马林固定后石蜡包埋连续切片，分别行HE染色，masson染色，以及a-actin免疫组织化学染色。采用IPP5.0图象分析软件比较各组问血管内膜厚度与中膜厚度之比，斑块面积与管腔面积之比，斑块内脂质浸润程度，斑块内胶原纤维以及平滑肌细胞的含量。 3.数据处理和统计分析全部数据以均数±标准差(Mean±Std．Deviation)表示，各组数据比较用单因素方筹分析(ANOVA)，不满足方差齐性者用Welch检验。所有资料使用SPSS10.0统计学软件进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。 结果： 1.血管内膜/中膜厚度之比：参照组显著低于其余四组(P<0.01)，CTLA-4组显著低于PBS组、IgG组及对照组(P<0.05)，PBS组、IgG组及对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 2.斑块面积/管腔面积之比：参照组显著低于其余四组(P<0.01)，CTLA-4Ig组显著低于PBS组、IgG组及对照组(P<0.01)，PBS组、IgC组及对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 3.斑块内脂质浸润程度：参照组显著低于其余四组(P<0.05)，CTLA-4Ig组显著低于PBS组、IgG组及对照组(P<0.05)，PBS组、IgG组及对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 4.斑块内胶原含量：参照组masson染色很少有胶原表达，CTLA-4Ig组显著高于PBS组、IgG组及对照组(P<0.05)，PBS组、IgG组及对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 5.斑块内平滑肌细胞含量：参照组斑块内很少有平滑肌细胞表达，CTLA-4Ig组显著高于PBS组、IgG组及对照组(P<0.05)，PBS组、IgG组及对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 结论： 1.CTLA-4Ig融合蛋白不能逆转已经形成的动脉粥样硬化病变，但可以延缓apoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的发生和发展。 2.CTLA-4Ig融合蛋白可以增加apoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的稳定性。