精液冷冻保存能延长精子的保存时间,但用冻精人工授精导致分娩率低且产仔数减少,这主要是由于低温导致的低温损伤。猪精液的保存方法分为液态(17℃)保存、超低温保存(-196℃)保存2种。液态形式做短期保存,冷冻形式做长期保存。猪精子对冷刺激,特别从体温急剧降温至10-0℃，会使精子发生不可逆的冷休克现象。因此,在稀释液中须添加抗冷冻剂,提高精子抗冷能力。本试验的主要目的是检测冷冻保护剂甘露醇对猪精液液态和超低温保存后精子质膜的完整性、顶体膜的完整性、精子内凋亡基因的表达以及精-卵结合能力的影响。试验结果如下:1、在液态保存过程中,在稀释液中添加甘露醇(0,0.3,0.6和0.9 mg/ml)保存5d后,精子的活力、质膜完整率和顶体膜的完整率有不同程度的减弱,但添加0.3和0.6mg/ml的处理组与Control组相比有显著的提高(P<0.05)。检测精子内凋亡基因Caspase-3、Caspase-8及TNF-α的表达量与精液品质检测结果相同,均有不同程度的改善(P<0.05),因此,在常温保存过程中添加甘露醇可以明显改善保存后精液的质量,提高受精率。2、在冷冻保存过程中,温度急速下降,对精子的质量造成的损伤相对较大,在冷冻保护剂中添加1mg/ml、2mg/ml(39.31%、43.89%)甘露醇的处理组精液冷冻解冻后,精子的活力与对照组(39.89%)相比有显著改善(P<0.05),同时,1mg/ml处理组精子的质膜完整率为43.10%,2mg/ml处理组的纸膜完整性为46.08%,均显著高于对照组(42.23%),且有显著差异(P<0.05),精子顶体膜完整性试验结果与质膜完整率结果相同,处理组精子的品质高于对照组。此外,对解冻后精子内凋亡基因的表达量进行检测,实验结果表明添加2mg/ml处理组的精子内凋亡基因表达量最少,说明精子凋亡程度较其他组相比较低,综上所述,添加甘露醇在冷冻过程中会保护精子免受打击损伤,提高精子质量。3、甘露醇对精子的保存具有保护作用,在常温保存过程中的最佳浓度为0.6mg/ml,在冷冻保存过程中最佳浓度为2mg/ml。