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为了提高紫杉醇的生物水溶性,增加其生物利用度,并降低毒性,利用SAS超微粉制备技术制备了紫杉醇微粉,进而对其抗肿瘤活性进行评价,发现与紫杉醇相比,紫杉醇微粉依然具有良好的肿瘤抑制作用,具有广阔的发展前景。本论文主要对紫杉醇微粉的抗肿瘤作用及凋亡机制进行研究。研究结果如下：1.应用MTT法研究紫杉醇微粉对肿瘤细胞株生长的影响,包括：人淋巴腺癌CEM细胞、乳腺癌MCF-7细胞、肺癌A549细胞、前列腺癌PC-3细胞,结果表明紫杉醇微粉作用四种肿瘤细胞株48h的IC50值分别为2.06±1.46μM,5.89±1.07μM,10.56±5.07μM和0.62±0.17μM；而阳性对照紫杉醇作用四种细胞48h的IC50值分别为1.73±0.13μM,3.82±1.25μM,15.71±3.21μM和1.60±1.25μM。结果表明紫杉醇微粉对PC-3细胞的敏感性最高,并且其体外抑制作用高于紫杉醇。2.选择S180荷瘤鼠动物模型研究紫杉醇微粉体内抗肿瘤活性,当给药剂量为10mg/kg时,紫杉醇微粉和紫杉醇的肿瘤抑制率分别为58.66%和61.16%,表明紫杉醇微粉在体内对S180肿瘤细胞生长有很好的抑制作用,且作用效果与紫杉醇相当。3.利用透射电镜及激光共聚焦显微镜进行PC-3细胞凋亡的形态学研究,结果0.5μM的紫杉醇微粉处理PC-3细胞48h后,可观察到明显的PC-3细胞凋亡的形态变化,并且其诱导PC-3肿瘤细胞凋亡的程度与紫杉醇相当。4.利用流式细胞仪分析了紫杉醇微粉以及紫杉醇处理PC-3细胞后对细胞周期的影响,结果不同浓度的紫杉醇微粉和紫杉醇作用PC-3细胞48h后,细胞周期发生了改变。主要作用于G2/M期,出现了G2/M期细胞大量滞留的现象,并且随着剂量的增加,这种变化愈加明显。因此,紫杉醇微粉和紫杉醇都能诱导PC-3肿瘤细胞凋亡,与引起G2/M期细胞大量累积有关。5.采用Rh123染色,利用流式细胞仪检测紫杉醇微粉对PC-3细胞线粒体膜电位变化的影响。结果显示PC-3细胞经过0.5μM的紫杉醇微粉作用后,随着作用时间的延长,低荧光强度部分细胞所占百分比逐渐增加,高于对照组。线粒体膜电位的降低暗示了紫杉醇微粉可能通过降低线粒体膜电位而引起PC-3细胞功能障碍。6.采用Fluo-3 AM荧光探针染色,利用流式细胞仪检测紫杉醇微粉对PC-3细胞Ca2+浓度变化的影响。结果显示PC-3细胞经过不同浓度的紫杉醇微粉作用24h后,细胞内Ca2+浓度有所升高,高于对照组。说明紫杉醇微粉在启动了细胞线粒体凋亡途径后可能调节了Ca2+水平。7.采用荧光酶法检测了紫杉醇微粉处理PC-3细胞引起的细胞内ATP水平的变化。结果发现,PC-3肿瘤细胞经过不同浓度的紫杉醇微粉作用不同时间后,均可引起细胞内ATP水平的降低,这一结果进一步证明了紫杉醇微粉和紫杉醇都是通过线粒体途径而引起PC-3肿瘤细胞的凋亡。8.采用比色法检测了紫杉醇微粉处理PC-3细胞引起的细胞内过氧化氢浓度的变化。结果表明,紫杉醇微粉作用PC-3肿瘤细胞1h后,可以诱导细胞中过氧化氢浓度的升高,且呈现一定的浓度依赖性。此外,如果在加药组的PC-3细胞中同时加入线粒体PTP专一阻断剂,那么PC-3细胞中过氧化氢的浓度会有所降低,此结果表明,紫杉醇微粉诱导PC-3肿瘤细胞凋亡可能是通过线粒体PTP通路完成的,且与氧化无关。本文体内和体外实验均表明了紫杉醇微粉具有很好的抗肿瘤活性,其对肿瘤细胞的生长抑制作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关。从多方面阐明了紫杉醇微粉诱导PC-3肿瘤细胞凋亡的机制主要是通过启动线粒体凋亡途径。实验结果对于进一步解决目前紫杉醇具有的水溶性差、生物利用度低等问题有重要的意义,而对紫杉醇微粉药物新剂型的开发提供了重要的理论基础,具有较好的应用价值。