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本文是以α-淀粉酶作为研究对象,选择合适的变性剂盐酸胍,并选择和对α-淀粉酶同时进行复性和分离的高效液相色谱相同的条件,在不同盐酸胍浓度变性的条件下,通过Micro DSC III微热量计测量α-淀粉酶在疏水填料表面置换吸附的总焓变。通过摇床法测定α-淀粉酶在不同条件下的吸附等温线,讨论α-淀粉酶的吸附平衡时间、吸附量,并依据计量置换吸附理论(SDT-A)及其热力学,计算吸附折叠过程中的能量变化。并且结合对α-淀粉酶的微量热研究,完善测定蛋白在液/固界面上折叠的热效应和自由能的量热方法,得到蛋白在疏水表面折叠的热效应,从而进一步获取蛋白的折叠自由能。在吸附实验的基础上,利用Sapphire DSC差示扫描量热计,对25℃吸附在PEG-600表面上的天然及变性α-淀粉酶进行热扫描,研究升温过程中不同盐酸胍浓度、盐浓度、表面覆盖度对吸附态α-淀粉酶热稳定性的影响,并与相同条件下吸附态α-淀粉酶的傅立叶变化红外光谱结果相比较,进一步探讨其构象变化规律。同时,使用高效液相色谱仪研究了20~35℃温度范围内,经不同浓度盐酸胍变性的α-淀粉酶在疏水作用色谱(HIC)中的保留行为。结果表明:天然及经盐酸胍变性的α-淀粉酶在HIC中的保留行为都很好地遵循非线性Van’t Hoff方程,并求算出α-淀粉酶在HIC中保留的热力学参数(ΔΗ~0,ΔS~0,ΔC_P~0和ΔG~0),发现在实验温度范围内,α-淀粉酶的保留由熵控制,焓变、熵变和热容量变三个热力学参数都与绝对温度的倒数之间存在线性关系。同时,对部分胍变α-淀粉酶的折叠自由能进行了测定,发现变性α-淀粉酶在HIC固定相表面的折叠自由能远较在溶液中的高,且对于相同浓度盐酸胍变性的α-淀粉酶,均以25℃时的折叠自由能为最大。还进一步研究了25℃时,流动相中的盐酸胍对HIC中天然α-淀粉酶保留行为的影响,并用计量置换保留理论(SDT-R)中的参数Z对HIC中盐酸胍变性的α-淀粉酶的分子构象变化进行了表征,对从分子水平理解生命体内的疏水相互作用力、蛋白分子的热变性都有重要意义。