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缺血缺氧导致的脑损伤是一个复杂的病理学过程,天然免疫系统的激活起到关键作用,多个信号通路共同参与其调节。天然免疫系统可以通过模式识别受体家族调控炎症反应,造成全身多个器官和系统受损,特别是对于中枢神经系统,对缺血缺氧导致的脑损伤加剧起到决定性作用。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的神经再生作用、神经保护作用、血管生成作用能在一定程度上改善中枢神经系统的缺血缺氧性损伤,对脑损伤能起到较好的治疗效果,是一种潜在的中枢神经系统缺血缺氧保护剂。19世纪90年代前后,很多科学家开始研究VEGF,此后,关于VEGF的研究大部分集中在癌症的研究,并取得了一定的进展。血管内皮生长因子,也被称为血管通透因子或促血管生成因子,其分子量大小为45 k Da,VEGF对内皮细胞有很强特异性,通常与肝素结合的并促进血管生成。VEGF共有5种剪接体,分别编码121、145、165、189、206个AA（氨基酸）。在上述5种VEGF剪接体中,VEGF165是一比较常见的种类,普遍存在于各种细胞中,对血管生成起重要调控作用。有文献报道VEGF有两种受体,VEGFR1和VEGFR2,VEGFR1为含激酶插入区受体（kinase domain region,KDR）/胎-肝激酶-1（fetal-liver kinase 1,FLK-1）,VEGFR2为fms样酪氨酸激酶-1（FLT-1）。VEGF与受体结合后,提高了微血管对大分子物质的通透性并促进血管内皮细胞的增殖。SR-A（A类清道夫受体）在小胶质细胞和巨噬细胞上普遍表达,是一种模式识别受体（PPR）,能够调控水通道和激活炎症信号通路,在中枢神经系统组织水肿的调控中发挥重要作用。SR-A功能直接影响小胶质细胞的活性,与多种神经性疾病的发生发展关系密切,尤其是在脑缺血缺氧导致的损伤中。第一部分建立大鼠脑缺血/再灌注损伤模型并检测小胶质细胞、星形细胞及神经元细胞的活化目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞、星形细胞及神经元细胞的活化。方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型,随机分为MCAO组和假手术组,应用免疫组织化学和免疫荧光检测小胶质细胞、星形细胞及神经元细胞的活化情况。结果:与假手术组相比,MCAO组的小胶质细胞和星形胶质细胞激活显著增加（P＜0.05）,而MCAO组的神经元细胞数量显著减少（P＜0.05）。结论:大鼠脑缺血再灌注损伤后,激活小胶质细胞和星形胶质细胞并导致神经元细胞的死亡。第二部分VEGF165抑制小胶质细胞介导的炎症反应目的:研究VEGF的一种剪切体（VEGF165）对小胶质细胞介导的炎症反应的影响。方法:在BV2细胞中过表达VEGF121,VEGF165和VEGF189,随机分为对照组和VEGF处理组,应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测炎症因子表达的差异。结果:与对照组相比,VEGF165处理组的炎症因子表达显著降低（P＜0.05）,而VEGF121和VEGF189处理组的炎症因子表达保持不变（P＞0.05）。结论:VEGF165可能抑制了小胶质细胞介导的炎症反应。第三部分SR-A在VEGF165治疗大鼠缺血性脑损伤中的介导作用目的:VEGF165在治疗大鼠缺血性脑损伤中有重要作用,通过构建MCAO大鼠脑缺血模型,同时体外培养小胶质细胞。分别在体内体外水平,VEGF165处理的同时过表达/抑制表达SR-A,研究SR-A在VEGF165改善大鼠缺血性脑损伤过程中的作用,揭示潜在的分子机制。方法:在MCAO动物模型,BV2小胶质细胞和原代小胶质细胞中,应用RT-PCR,Western blot和免疫荧光技术研究VEGF165对SR-A表达的影响。在BV2小胶质细胞和原代小胶质细胞中,应用Co-IP,RT-PCR和Western blot技术研究VEGF165通过哪种受体调控SR-A表达。在BV2小胶质细胞中,应用过表达SR-A,基因沉默SR-A和ELISA技术研究SR-A对神经炎症的调控。在MCAO动物模型和BV2小胶质细胞中,应用组织形态学和ELISA技术研究VEGF165通过调节SR-A对神经炎症和缺血性脑损伤的影响。结果:在MCAO动物模型,BV2小胶质细胞和原代小胶质细胞中,MCAO和OGD处理后,SR-A的表达都显著上调（P＜0.05）,VEGF165处理后,SR-A的表达回到正常水平。在BV2小胶质细胞和原代小胶质细胞中,VEGF165处理后,SR-A的表达显著下调（P＜0.05）,用VEGFR1抗体中和后,SR-A的表达回到正常水平,用VEGFR2抗体中和不能使SR-A的表达回到正常水平。在BV2小胶质细胞中,过表达SR-A显著上调LPS诱导的促炎症因子IL-1β、TNF-α和i NOS的表达（P＜0.05）,SR-A基因敲减后,明显抑制LPS诱导的促炎症因子IL-1β、TNF-α和i NOS的表达。VEGF165明显抑制LPS诱导的促炎症因子IL-1β、TNF-α和i NOS的表达（P＜0.05）,SR-A的过表达能够部分拮抗掉这种抑制。结论:VEGF165通过抑制SR-A的表达抑制神经炎症反应和缺血性脑损伤。