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超氧化物歧化酶简称SOD，是一种酸性金属酶，广泛存在于动物、植物、微生物体内。人们发现所有需氧细胞中都存在SOD，按照所含金属离子的不同，SOD可分为四种类型，即：Cu／Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD和Ni-SOD，其中Cu／Zn-SOD研究的最多。SOD能催化超氧阴离子自由基·O2-发生歧化反应，起到延缓衰老、提高机体免疫力并增强对疾病的抵抗力的作用。它不仅在医学、保健等领域有广泛的应用，而且是制备功能性食品的理想添加剂。目前国内外已对SOD的机理、纯化、应用作了大量的研究，但注意力大都集中在以动物血液为来源制取SOD方面上，存在着成本高、含有致热因子等缺陷。本试验以玉米胚为原料制取超氧化物歧化酶，除安全性极高外，主要原因在于原料来源丰富、价格低廉。吉林省是我国玉米主要产区之一，每年玉米的产量及库存量在国内外均名列前茅，但由于对玉米的综合利用程度不够，缺乏高科技含量、高附加值及市场潜力大的玉米精加工产品，到目前为止，吉林省的玉米产业优势还没有发挥出来。本试验以玉米湿法加工淀粉的副产物玉米胚芽为原料，可延长玉米产业链，实现玉米深加工副产物的高附加值综合利用，大幅度提高了玉米深加工企业经济效益，是从根本上解决吉林省玉米问题的有效途径之一。玉米胚在玉米籽粒中仅占10～13％，但却是玉米SOD主要存在部位，胚和胚乳中SOD的比值为1.9，说明胚里的SOD含量远高于胚乳。因此，从玉米胚中提取SOD，不仅使SOD提取工作量减轻，也使玉米综合利用更合理。本文以玉米湿法加工淀粉的副产物玉米胚芽为原料，经超临界CO2流体萃取脱脂，低温超细粉碎使玉米胚芽粉达到粒度要求，利用超声波提取的方法破碎细胞进行粗酶液的提取，同时采用热变性及丙酮沉淀相结合的方法对粗酶液进行预处理，SephadexG-75柱层析对其进行分离纯化，并利用紫外．可见分光光度计扫描吸收光谱对其进行定性分析。本研究选题来源于吉林省科技技术厅重点科技攻关项目《玉米自由基清除剂提取技术及应用》，对玉米超氧化物歧化酶（SOD）提取及纯化工艺进行了研究，并获得以下结果：1．超临界CO2流体萃取脱脂，脱除原料中的脂肪及异杂味，便于后续工作中SOD的提取。超临界萃取最佳工艺条件：压力20MPa、温度40℃、时间80min、流量15L／h；2．超声波提取技术的应用，能够在保持酶活性的前提下对细胞进行破碎溶解。超声波提取最佳工艺条件：固液比1：25、时间6s、次数40次、时间间隔2s；3．采用热变性和丙酮沉淀相结合的方法提纯。热变性方法简便、效果显著；加入丙酮的目的：一方面是通过沉淀去除杂蛋白，另一方面起到浓缩酶液的作用。热变性时间为15min、温度为60℃、酶活收率88.30％、蛋白质去除率77.12％、比活力188.39U／mg、纯化倍数3.86；丙酮的加入量为酶液的1.5倍，酶活收率为52.24％、蛋白去除率96.33％、比活力694.96U／mg、纯化倍数14.24；4．采用葡聚糖凝胶过滤的纯化方法，该方法具有效率高、设备简单、操作方便以及条件温和等优点。纯化后得到的SOD样品，酶活收率为40.56％、蛋白去除率99.36％、比活力为3079.41U／mg，纯化倍数达到63.09；5．本研究采用紫外分光光度计扫描吸收光谱对SOD进行定性分析，根据样品的紫外图谱与标准品比较，可以确定所提取物质为SOD。紫外波长扫描的结果表明其最大紫外吸收峰在260nm处，说明玉米胚SOD类型为Cu／Zn-SOD。