烟管菌M1对番茄灰霉病和黄瓜蔓枯病的防治作用

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生物农药安全性好,但能够商品化的种类较少,效果欠佳,亟需研制高效生物农药,增加种类,提高药效。番茄和黄瓜是人们喜爱食用的大宗蔬菜,防治其病害,减少化学农药的使用,降低农残危害人畜健康,减少经济损失是亟待解决的实际生产问题。烟管菌(Bjerkandera adusta)分布广泛,功能多样,研究多集中在其漆酶合成、纤维素和木质素降解等方面,论文进一步挖掘其农用功能。本文以番茄灰霉病和黄瓜蔓枯病为研究对象,以课题组自主分离的烟管菌菌株M1为供试菌,通过对峙培养试验和带毒平板拮抗试验研究其对番茄灰霉病病原菌:灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)和黄瓜蔓枯病病原菌:甜瓜球腔菌(Mycosphaerella melonis)的抑制作用;进一步温室盆栽试验研究烟管菌发酵液(Fermentation broth of B.adusta,FBB)对番茄灰霉病和黄瓜蔓枯病的防治效果,及对番茄和黄瓜植株的促生作用和诱导抗病性。以期为番茄和黄瓜的生产减少农药喷施、降低病害发生、安全生产等提供理论依据和技术支撑。其主要结果如下:1.烟管菌M1对番茄灰霉病的生防作用结果:在对峙培养试验中,培养第4天时,两者菌丝接触,灰葡萄孢生长明显受到烟管菌抑制,烟管菌则继续快速生长至完全覆盖灰葡萄孢,最终将其吞噬;光学显微镜下发现在二者菌丝接触的拮抗区,灰葡萄孢菌丝顶端膨大,释放出细胞质,菌丝变得空洞,而烟管菌菌丝则保持正常形态;扫描电镜观察到烟管菌菌丝可以直接刺透、穿插、缠绕灰葡萄孢菌丝,灰葡萄孢菌丝显示出扭曲,破裂的现象。在拮抗试验中,FBB对灰葡萄孢的抑制率为47.90%,与化学农药腐霉利(Procymidone,Pr)作用相当。在温室盆栽试验中,喷施灰葡萄孢孢子悬浮液(B.cinerea suspension,BS)的处理病情指数高达77.27;施用FBB后,可显著降低番茄灰霉病的病情指数,降低了54.54%,其防治效果为55.22%,略低于Pr处理(61.36%)。与喷施无菌水(CK1)相比,喷施FBB后,三种防御酶的活性提高幅度最大,其中过氧化物酶POD活性增加了41.15%、超氧化物歧化酶SOD活性提高了3倍、过氧化氢酶CAT活性提高了5倍,均显著高于BS和Pr处理;与CK1相比,喷施FBB的处理丙二醛MDA含量升高幅度低于BS处理,为38.36%;电解质相对外渗率:BS>Pr+BS>FBB+BS>CK1。在灰葡萄孢病菌胁迫下,FBB处理显著提高番茄的株高、茎粗、生物量和叶绿素含量,促生效果明显,其中对株高的促进作用最为明显,相比于CK1显著增加了51.59%,促生效果也优于Pr。综上所述:烟管菌菌株M1对灰葡萄孢具有很强的竞争作用和重寄生作用,能够显著抑制灰葡萄孢生长,使其畸变和破裂。喷施FBB能够降低番茄灰霉病的病情指数,提高防治效果;能够提高防御酶活性和降低丙二醛含量,使番茄防御能力提高,增强抗病性;喷施FBB促进了番茄植株生长,有利于增加产量。2.烟管菌M1对黄瓜蔓枯病的生防作用结果:对峙培养试验发现,烟管菌生长速度较快于甜瓜球腔菌,并形成明显拮抗带;甜瓜球腔菌受到烟管菌M1抑制,生长速度减缓,而烟管菌M1则继续保持快速生长至完全覆盖甜瓜球腔菌,将其吞噬;光学显微镜下观察发现,正常甜瓜球腔菌菌丝表面光滑,有清晰的横隔,菌丝顶端呈尖形,而在两者菌丝拮抗区,甜瓜球腔菌菌丝节间变短,变粗,菌丝顶端呈圆形,菌丝内部破裂,空泡化;进一步扫描电镜发现,烟管菌菌丝M1直接穿过甜瓜球腔菌菌丝,使甜瓜球腔菌菌丝裂解。拮抗试验发现,烟管菌M1发酵液(FBB)能够显著抑制甜瓜球腔菌的菌丝生长。FBB对甜瓜球腔菌的抑制率是65.9%,高于多菌灵(Carbendazim,CBZ)(54.62%);观察平板发现,FBB处理的甜瓜球腔菌菌落形态不规则,菌丝停止生长,呈现融解、死亡状态。在温室盆栽试验中,喷施甜瓜球腔菌孢子悬浮液(M.melonis suspension,MS)的处理病情指数达到49.36,而施用FBB后,可显著降低黄瓜蔓枯病的病情指数,降低了66.48%,其防治效果为66.34%,显著高于CBZ处理(50.61%);在甜瓜球腔菌的胁迫下,施用FBB后,三种防御酶(POD、SOD和CAT)活性都显著提高,分别提高了4倍、2.4倍和1.2倍,提高幅度均显著高于MS和CBZ处理;喷施FBB后,MDA含量(32.73%)升高幅度低于MS处理(48.51%);电解质相对外渗率:MS>FBB+MS>CBZ+MS>CK2;在甜瓜球腔菌胁迫下,FBB处理对黄瓜的株高、茎粗、生物量和叶绿素含量均有显著增加,增幅分别为43.64%、6.28%、51.59%和83.15%,促生效果明显。综上所述:烟管菌M1对甜瓜球腔菌有显著抑制作用,其发酵液可以融解甜瓜球腔菌菌丝,显著抑制其生长。喷施FBB可以降低黄瓜蔓枯病的病情指数;通过提高防御酶活性,诱导黄瓜植株增强抗病性;同时对黄瓜的促生效果明显,有助于增加黄瓜产量,实现减药增效。3.烟管菌M1对灰葡萄孢和甜瓜球腔菌具有竞争作用和抑制作用;可降低番茄灰霉病和黄瓜蔓枯病的病情指数;诱导番茄和黄瓜植株增强抗病性;促进番茄和黄瓜的生长,说明了烟管菌M1在防治植物病害上有很好的应用前景。
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