与周围神经系统不同，成年哺乳动物的中枢神经系统(centralnervoussystem，CNS)损伤后不能成功再生，造成的功能缺失也是不可逆的。视神经作为中枢神经系统的一部分，高眼压、炎性病变、创伤、缺血及肿瘤压迫等均能严重损伤视神经，造成视力严重丧失，预后不良。视神经损伤后的再生修复一直是困扰医学界的世界性难题。在神经科学领域，使受损的视神经修复再生，牵涉到中枢神经再生以及神经活动基本过程和神经损伤的一系列重要问题。因此，加强视神经损伤后修复的研究，对于视神经损伤的治疗乃至中枢神经系统损伤后的治疗具有极其重要的意义。 鼻、眼由于解剖的相关性，在外伤、炎症、肿瘤等疾病的发生、发展和转归紧密联系，形成一门新兴的边缘学科：鼻眼相关外科学。国内学者卜国铉、韩德民、王继群等对该领域进行较为深入的研究。鼻腔、鼻窦与眼眶在解剖结构上有着细微而复杂的毗邻关系。在构成上眼眶包括在额骨、颧骨、筛骨、蝶骨等颅面骨，而且骨壁相对较薄如纸板样。额骨、筛骨、蝶骨同时又是构成鼻腔和鼻窦的主要颅面骨，如筛窦外侧壁约80﹪为眼眶的内侧壁，后筛及蝶窦又与眶尖及视神经关系密切。此部位病变如筛、蝶窦骨折、炎症、囊肿及肿瘤等极易累及到视神经管内的神经而出现视力的障碍。如病变突破眼眶壁进入眶内则出现眼痛、眼球移位、视力障碍等。鼻眼解剖结构使的从鼻内进路进入到眶内和到达视神经内侧非常直接和简单。使用内窥镜可以进行视神经管减压等手术，但术后视力恢复还不理想，主要是视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinalganglioncell，RGC)的保护和轴突再生的机制尚不明确。 2000年初，有三个实验室(美国、英国、瑞士)同时克隆了抑制受损神经再生的基因——Nogo基因，这一发现被誉为是“探索中枢神经损伤修复漫长道路的里程碑”。Nogo分子有三个异构体：Nogo-A，-B，-C。它们是同一Nogo基因通过不同的启动子或RNA剪接方式形成的。其中跨膜蛋白Nogo-A是抑制中枢神经系统损伤轴突再生的重要分子，其两个跨膜区段之间由66个氨基酸残基组成的环状结构Nogo-66，被证明是Nogo-A分子中抑制神经元突起生长的重要结构域。Nogo-A分布于中枢神经系统的白质中，在髓鞘和培养的少突胶质细胞中均可以检测到。原位杂交法显示，在视神经中Nogo-AmRNA呈串珠状排列。 Fournier等在2001年利用碱性磷酸酶融合技术首次发现了NgR，即Nogo-66的受体，又为中枢神经系统再生的研究翻开了新的一页。人、小鼠和大鼠的NgR基因都编码473个氨基酸，具有一个氨基末端易位信号序列，紧连着8个富亮氨酸(LRR)的特征单元，一个LRRC-末端区(LRRCT)和一个C末端(CT)结构域，其中LRR和LRRCT是与MAG，Omgp和Nogo-66结合的区域。作为GPI锚定蛋白，NgR与神经营养因子受体p75组成的受体复合物不但可以传递Nogo-A的抑制信号，而且可以传递CNS髓鞘中另外两种轴突生长抑制蛋白MAG和OMgp的抑制信号。2002年，wang等报导NgR的N末端LRR，LRRCT和C末端这些结构域都是与p75作用必不可少的部位；Nogo-66和MAG作用于p75基因敲除的小鼠神经元，并不能抑制轴突生长，也就是说，单纯的NgR并不能介导抑制作用。 2000年，美国学者首次在实验研究中发现视神经损伤如果伴有晶状体损伤可以促进RGC再生其轴突，从而达到视神经再生的目的，并排除BDNF，NT4/5，GDNF、bFGF、CNTF在其中起作用的可能，认为与晶状体损伤后巨噬细胞激活有关。2003年，Yin等发现仅在眼内注射可激活巨噬细胞的促炎性物质也促进了视神经轴突的再生。 由于删除了CT的NgR(NgRDN)虽然可以与MAG，Omgp和Nogo-66结合，但不能结合p75，从而失去了介导轴突再生的抑制作用。我们拟利用含NgRDN的重组腺相关病毒(rAAV)转染大鼠RGC，观察其对视神经损伤后再生的影响，并观察其与晶体损伤及巨噬细胞激活之间的关系，探讨NgR在视神经再生机制中的意义，为视神经损伤后修复寻找新的治疗方法。 第一部分定量大鼠视神经损伤模型的建立； 第二部分重组腺相关病毒的制备和纯化； 第三部分rAAV对视网膜的转染及NgR在视网膜中的表达； 第四部分rAAV-NgRDN对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞轴突生长的影响； 第五部分rAAV-NgRDN促进成年大鼠损伤后视神经轴突再生的实验研究。