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目的:子宫内膜异位症（Endometriosis,EMS）发病机制尚未完全阐明,罗氏内异方多年来应用于临床上疗效令人满意,但是对于其发挥作用的机制研究较少。本研究拟通过临床研究分析EMS发病的相关因素,体外实验研究则从细胞水平研究罗氏内异方的作用机制。卵巢型EMS临床发病率高且取材方便,是进行体外异位内膜细胞原代培养实验的优选。EMS具有类癌的生物行为,我们选择在癌症及EMS发展过程中均起重要作用的自噬作为切入点,以mTOR抑制剂替西罗莫司为对照药物,重点观察罗氏内异方如何调控PI3K/Akt/mTOR信号通路及自噬机制。方法:1.临床研究收集经广州中医药大学第一附属医院收治的行手术治疗的105例EMS患者的相关信息,所有患者术后均经病理诊断为EMS。设计调查问卷表收集患者的一般资料、手术资料以及中医望、闻、问、切四诊症候资料等,分析发病相关因素及中医证型分布等。2.体外实验研究采集在广州中医药大学第一附属医院行手术的卵巢型EMS患者的异位内膜组织、输卵管阻塞性不孕患者的正常内膜组织各20例,从中提取原代细胞进行培养和传代,根据组织来源分为异位内膜细胞（Oc组）和正常内膜细胞（Cc组）。用第三代的细胞制作细胞爬片进行免疫细胞化学鉴定。罗氏内异方、替西罗莫司药物的浓度筛选使用第三代异位内膜细胞进行CCK-8检测。Oc组细胞分为3组:空白组、罗氏内异方组、替西罗莫司组,Cc组也分为同样的三组。根据分组分别加入对应的药物培养24小时,再使用Western Blot法检测各组中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、PI3K、Akt、4EBP1、S6K1、mTOR蛋白的表达情况。结果:1.临床研究:（1）EMS各发病相关因素的比例分布:（1）年龄和籍贯:EMS患者主要集中在26-35岁的患者,年龄在26-35岁区间的占49.53%;广东省内的占71.43%。（2）体重指数:BMI在标准范围内的占68.57%（72/105例）,偏瘦占16.19%（17/105例）,偏重及肥胖的共占15.24%（16/105例）。（3）生育情况:妊娠次数1-2次占45.71%（48/105例）,妊娠次数≥3次占18.1%（19/105例）,分娩次数1-2次占43.18%（46/105例）,分娩次数≥3占3.81%（4/105例）,流产次数1-2次占33.33%（35/105例）,流产次数≥3占4.76%%（5/105例）,从未妊娠占36.19%（38/105例）,有生育要求但从未妊娠占20%（21/105例）。（4）相关抗原指标:CA125升高占64.86%（48/74例）,CA199升高占36.23%（25/65例）,两者均升高的占31.75%（20/63例）。（5）rAFS分期:主要集中在Ⅲ期和Ⅳ期,均占36.19%（38/105例）,Ⅰ期占20%（21/105例）,Ⅱ期占7.62%（8/105例）。（6）月经情况:周期不规律占19.1%（19/105例）,量少占15.24（16/105例）,量多占7.62%（8/105例）,色黯红占39.05%（41/105例）,色暗淡占12.38%（13/105例）,有血块占66.67%（70/105例）,伴随腹痛占54.29%（57/105例）,腰酸占47.62%（50/105例）,乳胀占48.57%（51/105例）。（2）各中医证型比例分布:痰瘀互结证占25.71%（27/105例）,寒凝血瘀证占18.1%（19/105例）,气虚血瘀证占17.14%（18/105例）,气滞血瘀证占14.29%（15/105例）,肾虚血瘀证及湿热血瘀证均占12.38%（13/105例）。2.体外实验研究（1）细胞培养:异位内膜细胞、正常内膜细胞分离培养成功率分别为85%（17/20例）、75%（12/20例）。2种细胞24小时均能贴壁,异位内膜细胞及在位内膜细胞生长融合成片至90%以上大约需10-12天,正常内膜细胞大约需8-10天。（2）细胞鉴定:传三代的细胞爬片经Anti-Vimentin Antibody及Anti-PCK-26Antibody抗体的免疫细胞化学鉴定,可见胞浆呈棕黄色改变。（3）药物浓度筛选:CCK-8法检测细胞增殖筛选药物浓度,最终选定罗氏内异方浓度为20mg/ml,替西罗莫司浓度均为0.001m M。（4）相关蛋白表达检测:WB法检测各组细胞中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、PI3K、Akt、4EBP1、S6K1、mTOR蛋白的表达结果提示,在Cc组中,罗氏内异方组较空白组相比,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白水平上升,其中仅LC3Ⅰ的蛋白上升水平P<0.05,PI3K、4EBP1、S6K1、mTOR、Akt的蛋白水平下降,其中PI3K、4EBP1、S6K1的蛋白下降水平均P<0.05;替西罗莫司组较空白组相比,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白水平显著上升（P<0.05）,PI3K、4EBP1、S6K1、mTOR、Akt的蛋白水平下降,其中PI3K、4EBP1、mTOR的蛋白下降水平P<0.05。在Oc组中,罗氏内异方组较空白组相比,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白水平显著上升（P<0.05）,PI3K、Akt、4EBP1、S6K1、mTOR的蛋白水平显著下降（P<0.05）;替西罗莫司组较空白组相比,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白水平显著上升（P<0.05）,PI3K、Akt、4EBP1、S6K1、mTOR的蛋白水平显著下降（P<0.05）。结论:1.调查中发现EMS患者主要集中在26-35岁区间,CA125升高占64.86%,CA199升高占36.23%。2.中医证型以痰瘀互结证和寒凝血瘀证为主,其后依次是气虚血瘀证、气滞血瘀证、肾虚血瘀证、湿热血瘀证。3.罗氏内异方可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活,增强自噬来发挥对卵巢型EMS的治疗作用。