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目的:采用异种蛋白BGG构建IgAN大鼠模型,研究黄芪桂枝五物汤对AT1R/Nephrin/c-Abl通路的影响,探索黄芪桂枝五物汤减轻足细胞骨架蛋白损伤,保护肾脏足细胞的机制。方法:120只SD大鼠,随机分为2组:正常组(20只)、模型组(100只)。采用口服0.1%BGG酸化水8周联合尾静脉连续3日注射1mg BGG,构建IgAN大鼠模型。造模13周,于实验第5周、第7周、第10周、第12周、第13周末收集大鼠24h尿液,检测24h尿蛋白定量、UACR、24hm Alb、m Alb;第5周、第12周末检测血清BUN、Scr、UA、Alb、ALT、AST、TC、TG。随机选取正常组2只,模型组9只大鼠,摘除肾脏检测IgA、Ig G、Ig M、C3和Clq的荧光表达和肾脏病理染色。第13周末判断IgAN大鼠造模成功后,根据大鼠24h尿蛋白水平使用IBM SPSS Statistics 23软件将模型组90只大鼠,随机分为5组,每组18只:模型组,黄芪桂枝五物汤低剂量组,黄芪桂枝五物汤中剂量组,黄芪桂枝五物汤高剂量组,缬沙坦组。药物治疗4周后,检测大鼠尿液、血清相关指标,肾脏病理HE、Masson、PAS、PASM染色,肾脏IgA荧光及肾脏电镜。免疫组织化学、Real-Time PCR、Western blot方法检测Nephrin、Podocin、ACTN4、TNF-α、TNFR1、AT1R、p-Nephrin、c-Abl在肾脏的分布和基因、蛋白水平的表达。免疫荧光法检测Podocin在肾脏的定位表达。免疫荧光双染法检测肾脏F-actin、TNFR1、AT1R、c-Abl与Nephrin共表达情况。结果:与正常组相比较,IgAN模型组大鼠在第12周出现蛋白尿(P<0.05),肾脏肾小球系膜区可见明显IgA、C3的沉积(P<0.05),并伴少量的Ig G和Ig M的沉积(P<0.05),未见Clq的沉积(P>0.05),肾脏组织的病理可见明显的系膜细胞的增生和基质的增多。药物治疗后,黄芪桂枝五物汤改善了大鼠的精神萎靡、饮食、倦怠等一般症状,与模型组相比,治疗组蛋白尿减少(P<0.05),Scr、UA、TG降低(P<0.05),Alb水平升高(P<0.05),收缩压和舒张压得到改善(P<0.05),其中以黄芪桂枝五物汤中剂量组效果最好。与正常组比较,模型组Nephrin、Podocin、pNephrin、ACTN4在基因和蛋白水平表达明显减少(P<0.05),TNF-α、TNFR1、AT1R、c-Abl表达明显增多(P<0.05)。与模型组比较,黄芪桂枝五物汤增加了Nephrin、Podocin、p-Nephrin、ACTN4在基因和蛋白水平的表达(P<0.05),抑制TNF-α、TNFR1、AT1R、c-Abl的表达(P<0.05)。黄芪桂枝五物汤中剂量组在Nephrin、Podocin蛋白水平和阳性面积表达方面,优于黄芪桂枝五物汤低、高剂量组(P<0.05),在Nephrin、Podocin基因表达方面优于黄芪桂枝五物汤低剂量组(P<0.05)。黄芪桂枝五物汤低、中剂量组在ACTN4蛋白水平表达方面优于黄芪桂枝五物汤高剂量组(P<0.05),在ACTN4基因和阳性面积表达方面优于黄芪桂枝五物汤低、高剂量组(P<0.05)。免疫荧光双染示IgAN模型组大鼠肾小球Nephrin表达减少(P<0.05),AT1R、TNFR1、c-Abl表达增多(P<0.05),在肾小球基底膜可见明显的Nephrin/TNFR1、Nephrin/AT1R、Nephrin/c-Abl共定位表达,黄芪桂枝五物汤可以增加IgAN大鼠肾小球Nephrin的表达(P<0.05),减少AT1R、TNFR1、c-Abl的表达(P<0.05)。结论:1.采用口服0.1%BGG酸化水8周联合尾静脉连续3日注射1mg BGG,可以成功构建IgAN大鼠模型。2.黄芪桂枝五物汤中剂量组疗效最好。3.黄芪桂枝五物汤保护肾脏的机制之一是通过调节AT1R/Nephrin/c-Abl通路减轻足细胞骨架蛋白的损伤,抑制了炎性因子TNF-α及其受体TNFR1的表达,可能抑制了系膜细胞与足细胞之间的“交互对话”。4.黄芪桂枝五物汤保护肾脏的作用机制之二可能通过减轻免疫复合物沉积导致的足细胞骨架蛋白的损伤,可以修复Nephrin、Podocin、ACTN4、F-actin的损伤。