目的:(1)对发酵冬虫夏草菌粉及百令胶囊的化学成分进行系统研究,并与冬虫夏草及其他6种发酵制剂进行比较,寻找其特征成分;(2)建立百令胶囊的HPLC指纹图谱方法;(3)建立百令胶囊核苷类及糖醇类成分的多指标定量分析方法。方法:(1)采用LC-MS/MS、GC-MS/MS对发酵冬虫夏草菌粉及百令胶囊中核苷类、糖醇类及其他类成分进行定性分析,并与冬虫夏草及其他6种发酵制剂进行比较,寻找其特征成分。(2)采用HPLC-DAD法,建立百令胶囊的HPLC指纹图谱,并进行方法学验证。(3)采用HPLC-DAD法,建立同时测定百令胶囊中尿苷酸、鸟苷酸、尿苷、腺苷酸、鸟苷及腺苷等六种核苷类成分含量的方法;采用UPLC-ELSD法,建立同时测定百令胶囊中赤藓糖醇及甘露醇等两种糖醇类成分含量的方法,并进行方法学验证。结果:(1)发酵冬虫夏草菌粉及百令胶囊中核苷类成分主要由尿苷酸、尿嘧啶、鸟苷酸、尿酸、尿苷、腺苷酸、腺嘌呤、鸟苷、肌苷及腺苷组成,其中尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸、尿酸、肌苷为本文首次确认,鸟苷酸为特征成分,尿苷酸、腺苷酸与其他发酵制剂有明显区别;糖醇类成分主要由赤藓糖醇、甘露醇组成,首次发现赤藓糖醇为其特征成分。挥发性成分主要由亚油酸甲酯、棕榈酸、亚油酸组成。(2)建立了百令胶囊的HPLC指纹图谱方法,经方法学验证表明,该方法准确、简便、重现性好。分别测定了百令胶囊及发酵冬虫夏草菌粉各20批,结果建立的指纹图谱有9个共有峰。发酵冬虫夏草菌粉样品的相似度在0.959～0.995之间,百令胶囊样品的相似度在0.972～0.995之间,平均相似度均为0.985,其他发酵制剂相似度在0.346～0.829之间。(3)Ⅰ首次建立了核苷类成分的HPLC-DAD多指标含量测定方法,并经方法学验证,结果:尿苷酸、鸟苷酸、尿苷、腺苷酸、鸟苷及腺苷分别在35.25～528.8、43.99～659.9、38.07～571.1、34.96～524.5、38.34～575.1和39.84～597.6μg范围内呈良好的线性关系。尿苷酸、鸟苷酸、尿苷、腺苷酸、鸟苷、腺苷的回收率分别为101.2%、97.14%、103.1%、96.72%、101.4%和103.2%。20批发酵冬虫夏草菌粉六种核苷类成分含量范围分别为1.221～1.861、1.256～2.234、0.9731～1.859、1.144～2.173、1.144～2.372、1.260～2.201mg/g;20 批百令胶囊含量范围为 0.9753～2.007、0.9194～2.512、1.504～1.581、1.045～2.500、1.146～1.812、1.378～2.025mg/g。Ⅱ建立了糖醇类成分的UPLC-ELSD多指标含量测定方法,并经方法学验证。结果:赤藓糖醇及甘露醇分别在0.8234～4.940和0.2812～1.687mg范围内呈良好的线性关系。赤藓糖醇及甘露醇的回收率分别为103.1%和95.48%。23批发酵冬虫夏草菌粉赤藓糖醇和甘露醇含量范围为18.96～68.22和6.94～25.07mg/g;20批百令胶囊赤藓糖醇和甘露醇含量范围为10.22～55.54和4.72～35.23mg/g。结论:(1)本课题对发酵冬虫夏草菌粉及百令胶囊的化学成分进行了系统研究,可为进一步建立基于主要化学成分的质控标准奠定基础。并且与其他发酵制剂的比较发现,尿苷酸、腺苷酸含量明显高于其他发酵制剂,鸟苷酸及赤藓糖醇为特征成分,为与其他发酵制剂相区别起到重要作用。(2)本课题所建立的指纹图谱评价体系能区别其他发酵制剂且促进了生产工艺量化操作与规范化管理,保证制剂内在质量的一致性与产品的稳定性。(3)多指标含量测定方法的建立,完善了百令胶囊的质量标准,为全面控制百令胶囊的质量、保障工艺的稳定、确保制剂的质量提供了合理的分析手段。