论文部分内容阅读
目的：研究TGF-β1siRNA对CCL4诱导的肝纤维化大鼠Smad蛋白影响。方法：采用前期构建的TGF-β1siRNA治疗前后肝纤维化大鼠的肝脏组织作为研究对象，将其分为5组：正常组、模型组、阴性对照组（0.25mg/kg非特异性靶序列)、TGF-β1siRNA0.125mg/kg组和TGF-β1siRNA0.25mg/kg组。免疫组织化学和Western blot检测Smad2、3、4、7的蛋白表达；Real-time PCR法检测Smad2、3、4、7的mRNA表达。结果：免疫组织化学结果显示TGF-β1siRNA0.25mg/kg组及0.125mg/kg组Smad2/3、4的蛋白表达量较模型组、阴性对照组明显减少（F值分别为115.538，117.178，P<0.05），TGF-β1siRNA0.25mg/kg组较0.125mg/kg组表达量少（P<0.05）；TGF-β1siRNA0.25mg/kg组及0.125mg/kg组Smad7的蛋白表达量较模型组、阴性对照组增加（F=125.34,P<0.05），TGF-β1siRNA0.25mg/kg组较0.125mg/kg组表达量多（P<0.05）,Western blot也显示相同趋势。Real-time PCR结果显示与模型组和阴性对照组比较，TGF-β1siRNA可以明显抑制Smad2、3、4基因的表达，且TGF-β1siRNA0.25mg/kg组Smad2、3、4的mRNA表达量较TGF-β1siRNA0.125mg/kg组明显减少（P<0.05）。TGF-β1siRNA0.25mg/kg组及0.125mg/kg组Smad7的mRNA表达量较模型组、阴性对照组增加（F=29.615，P<0.05），TGF-β1siRNA0.25mg/kg组较0.125mg/kg组表达量多（P<0.05）。结论：TGF-β1siRNA干扰大鼠TGF-β1表达后，Smad2、3、4表达量明显降低，而Smad7表达仍维持在较高水平，这种状态有利于肝纤维化的改善。