目的：通过进行体外的细胞实验，探究培美曲塞（Pemetrexed,Pem）对人肺腺癌HCC827细胞株增殖抑制作用的影响以及对程序性死亡配体-1（programmed cell death-Ligand1,PD-L1）、磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol3kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）通路相关蛋白AKT、p-AKT表达的影响，并进一步探索其可能的作用机制。
　　方法：（1）HCC827肿瘤细胞的培养：把HCC827肺癌细胞培养在含有10%胎牛血清的1640培养基里，然后放在含有5%CO2、37℃恒温、饱和湿度的培养箱里，采用处于对数期的肿瘤细胞作为后续实验的实验细胞。（2）取用浓度依次为0、0.01、0.1、1、10、100μmol/L的培美曲塞分别处理HCC827细胞12、24、48h，CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用及确定培美曲塞的半数抑制浓度（IC50），同时选最佳作用时间（48h）作为后续实验的干预时间，并将该时间时对应的培美曲塞的IC50作为后续实验里的药物浓度。（3）采用流式细胞仪检测不同浓度的培美曲塞（0、0.01、0.1、1、10、100μmol/L）作用于细胞48h后PD-L1的表达情况，并行统计学计算处理，用以比较各组间的差异。（4）实验分组和处理：把实验分成4组，依次为对照组（添加培养液）、IC50培美曲塞组、PI3K/AKT通路激活剂740Y-P组、IC50培美曲塞+740Y-P组。（5）蛋白免疫印记杂交法（Western Blot）检测各组AKT、p-AKT蛋白表达情况：按照方法（4）的分组，处理细胞48h后使用Western Blot测定各组AKT、p-AKT蛋白表达情况，并对各组间差异进行比较。（6）流式细胞仪检测各组PD-L1表达水平：按照上述分组情况，处理细胞48h后使用流式细胞仪检测各组PD-L1表达水平，同时对各组PD-L1表达差异进行比较。
　　结果：（1）CCK-8法检测培美曲塞对肿瘤细胞的增殖抑制作用：与对照组相比较，随着培美曲塞浓度的上升，抑制率逐渐增加（P＜0.05），各组两两比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；培美曲塞48h组抑制作用强于12h组（P＜0.05），与24h组抑制率无明显差别，差异无统计学意义（P＞0.05），选择48h作为后续实验时间，48h培美曲塞IC50值为0.171μmol/L；（2）流式细胞术检测不同浓度的培美曲塞对肿瘤细胞PD-L1表达的影响：随着培美曲塞浓度增加，各组细胞PD-L1表达逐渐下降（55.07±1.81、44.83±1.74、38.3±1.73、27.13±0.78、23.4±1.21、16.73±0.76），与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；（3）Western Blot测定每一组的p-AKT、AKT表达变化情况：各组细胞被干预48h后，对照组、IC50Pem组、740Y-P组、IC50Pem+740Y-P组p-AKT蛋白表达水平分别为0.24±0.01、0.05±0.01、0.54±0.03、0.13±0.01；与对照组相比，740Y-P组的p-AKT蛋白表达水平升高（P＜0.05），在IC50Pem组、IC50Pem+740Y-P联合组中表达降低（P＜0.05），且IC50Pem组的p-AKT表达低于IC50Pem+740Y-P组（P＜0.05）。各实验组AKT蛋白表达量依次为0.63±0.03、0.64±0.04、0.63±0.03、0.65±0.02，两两比较差异没有统计学意义（P＞0.05）；（4）流式细胞术检测各实验组PD-L1表达情况：作用于各组细胞48h后，PD-L1表达水平分别为59.83±2.58、32.5±1.04、71.63±2.82、41.1±2.48，与对照组相比，PD-L1表达量在740Y-P组上调（P＜0.05），在IC50Pem组、IC50Pem+740Y-P组中表达量降低（P＜0.05），且IC50Pem组的PD-L1表达量低于IC50Pem+740Y-P组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论：（1）培美曲塞可抑制HCC827细胞的活性与增殖能力，随着培美曲塞药物浓度的增加，细胞增殖能力逐步降低，且具有一定的浓度依赖性。（2）培美曲塞可下调p-AKT及PD-L1蛋白的表达。（3）培美曲塞下调HCC827细胞PD-L1的表达，其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。