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目的:研究多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome，PCOS)患者血清多种脂肪细胞因子(adipocytokines)水平与血清性激素及胰岛素水平的关系；研究脂肪细胞因子基因在以脱氢表雄酮(dyhydroepiandrosterone，DHEA)诱导的PCOS模型大鼠脂肪组织中mRNA和蛋白的表达及其与胰岛素抵抗(insulinresistance，IR)的关系；研究脂肪细胞因子的主控基因过氧化物酶体增殖体激活受体γ(peroxisomeproliferater-activatedreceptorγ，PPARγ)在PCOS大鼠模型脂肪组织及卵巢中的表达。旨在探讨脂肪细胞因子在PCOSIR发生机制中的作用。
方法:1.应用化学发光法检测肥胖PCOS组(26例)和非肥胖PCOS组(20例)、肥胖对照组(25例)和非肥胖对照组(25例)的血清黄体生成素(luteinizinghormone，LH)、卵泡刺激素(folliclestimulatinghormone，FSH)、睾酮(testosterone，T)的水平；应用己糖激酶终点法测定空腹血糖(fastingplasmaglucose，FPG)；应用时间分辨免疫分析法测定空腹血清胰岛素(fastinginsulin，FIN)；应用ELISA法测定血清TNF-α、脂联素(adiponectin)、抵抗素(resistin)水平；应用稳态模型胰岛素抵抗(Homeostasismodelassessment-IR，HOMA-IR)指数计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，以分析各脂肪细胞因子与IR的关系。2.应用脱氢表雄酮DHEA诱导未成年雌性SD(Sprague-Dawley)大鼠构建PCOS动物模型；应用化学发光法测定大鼠PCOS组(19例)、对照组(19例)性激素水平；应用放射免疫(RIA)法测定大鼠血胰岛素水平；应用京都血糖自动分析仪(GT-1640)测定血糖水平；应用光镜、电镜检查观察PCOS组和对照组卵巢形态学的变化。3.应用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)法检测PCOS组和对照组大鼠脂肪组织中TNF-α、脂联素、抵抗素、PPARγmRNA的表达，并进行半定量分析。4.应用Westernblot技术检测PCOS组和对照组大鼠脂肪组织中TNF-α、脂联素、抵抗素、PPARγ蛋白质的表达，并进行半定量分析。5.应用免疫组织化学技术检测PCOS组和对照组大鼠卵巢和脂肪组织中PPARγ的分布和表达。
结果:1.PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组患者血清LH水平及LH/FSH比值均显著高于其对照组(P＜0.001)；PCOS非肥胖组的LH水平和LH/FSH比值较PCOS肥胖组升高更显著(P＜0.01和P＜0.001)；血清T的水平在PCOS两组均显著高于对照组(P＜0.001)；PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组FIN和HOMA-IR均显著高于相应对照组(P＜0.001)；PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组TNF-α和抵抗素均显著高于其对照组，而脂联素显著低于相应的对照组(P＜0.001)；PCOS非肥胖组的TNF-α和抵抗素高于、脂联素低于肥胖对照组，差异具有显著性(P＜0.05)；相关分析表明，PCOS组TNF-α、抵抗素与FIN、HOMA-IR、LH、LH/FSH呈显著正相关(P＜0.05)，而脂联素与FIN、HOMA-IR、LH、LH/FSH呈显著负相关(P＜0.05)。2.PCOS组大鼠卵巢重量为0.032±0.007g/卵巢，显著高于对照组0.029±0.008g/卵巢(P＜0.05)；光镜下见PCOS组卵巢囊性扩张的卵泡增多，颗粒细胞层数减少至2～3层，且黄体形成比例明显低于对照组；电镜下见PCOS组靠卵泡壁的颗粒细胞呈柱状排列，卵泡腔内颗粒细胞和间质细胞胞浆内有丰富的滑面内织网、线粒体和大量脂滴。3.PCOS组大鼠血清T浓度非常显著地高于对照组(P＜0.001)；血清E2浓度显著高于对照组(P＜0.05)；PCOS组空腹血糖明显高于对照组(P＜0.001)，实验组空腹及服糖后2h血胰岛素水平显著高于对照组(P＜0.05)，空腹血胰岛素与血糖比值(INS/GC)非常显著高于对照组(P＜0.001)，服糖后2hINS/GC显著高于对照组(P＜0.05)。4.RT-PCR法检测结果显示：PCOS组大鼠脂肪组织中TNF-α、抵抗素mRNA的表达显著高于对照组(P＜0.05)，而脂联素和PPARγ的mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05)。5.Westernblot检测结果显示：PCOS组大鼠脂肪组织中TNF-α、抵抗素蛋白表达显著高于对照组(P＜0.05)，而脂联素、PPARγ的蛋白表达显著低于对照组(P＜0.05)。6.免疫组化技术检测显示：PPARγ主要在脂肪组织的细胞核中表达，呈棕黄色颗粒状表现，PCOS组大鼠脂肪组织中PPARγ的表达少于对照组，对照组脂肪组织中PPARγ呈强阳性表达，差异具有显著性意义(P＜0.05)；PPARγ在卵巢组织中呈弱阳性表达，且PCOS组和对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。
结论:1.PCOS患者血清脂肪细胞因子水平与IR密切相关，是影响PCOS发病的重要因素。2.以DHEA诱导未成年雌性SD大鼠构建的PCOS动物模型是研究PCOS较为理想的动物模型。3.PCOS大鼠脂肪细胞因子基因及蛋白表达水平均发生变化，说明脂肪细胞因子基因的变化可能与PCOSIR紧密相关。4.PCOS大鼠脂肪组织中PPARγ含量减少，而卵巢组织含量没有变化，说明脂肪细胞因子含量的变化与卵巢组织无关，而与脂肪组织中主控基因PPARγ的变化有关，从而进一步影响了PCOSIR的发生和发展。
以上结论提示，脂肪细胞因子在PCOSIR发生发展中起着重要的作用，是PCOS病理生理改变的重要机制。深入研究脂肪细胞因子基因及其信号转导机制，将有助于了解PCOSIR和相关综合征的发病机制，最终为治疗找到更有效、更安全的药物，使PCOS及并发症的预防和治疗成为可能。