CIK增强顺铂对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用

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目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells, CIK)联合顺铂对人肺腺癌细胞系A549的细胞毒作用,探讨两者之间是否存在协同作用。方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMC)在体外用细胞因子诱导形成CIK细胞。CIK细胞、顺铂、CIK联合顺铂各作用于A549细胞24h、48h。应用MTT法检测各组细胞吸光度值(A值),计算各组细胞杀伤率。完全培养液培养CIK48h后取上清液,按1:1稀释后,与A549细胞共培养24h,应用流式细胞仪检测A549细胞凋亡。结果:效靶比为5:1、10:1、20:1、40:1时,CIK作用A549细胞24h、48h,A549的杀伤率分别为(19.11±1.89)%、(25.40±4.14)%、(39.41±2.73)%、(50.65±5.30)%和(21.09±5.21)%、(43.87±1.90)%、(50.21±4.06)%、(66.17±1.92)%。统计分析显示,效靶比为5:1培养48h时,CIK对A549杀伤率与24h时无显著性差异;效靶比为10:1、20:1、40:1培养48h时,CIK对A549杀伤率显著高于24h时(P<0.05);相同作用时间,CIK对A549杀伤率随效靶比的增加而增加(P<0.05)。浓度为2.5、5、10、20、40μg/mL的顺铂作用于A54924h时,A549的杀伤率分别为(10.19±1.56)%、(33.42±5.37)%、(42.34±4.69)%、(49.85±3.84)%、(55.89±3.43)%;作用48h时,A549的杀伤率为(27.90±2.69)%、(49.85±2.48)%、(65.69±1.35)%、(72.18±1.06)%、(79.36±1.17)%。统计分析示,同一时间内,顺铂对A549杀伤率随顺铂浓度的升高而升高(P<0.05);顺铂浓度为5、10、20、40μg/mL作用48h时,顺铂对A549杀伤率高于24h时(P<0.05)。5μg/mL的顺铂联合效靶比为10:1、20:1的CIK与A549细胞共培养24h,A549的杀伤率分别为(53.80±6.81)%、(61.17±3.82)%,与单用顺铂及CIK相比,杀伤率显著升高(P<0.05)。CIK联合顺铂对A549的杀伤活性显著高于CIK、顺铂单独作用对A549的杀伤活性。CIK上清液可诱导A549细胞凋亡。结论:CIK可以增强顺铂对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用。
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