沉默DEPDC1抑制鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移

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DEPDC1是一个新的与肿瘤相关的基因,在多种恶性肿瘤的发生发展过程中起重要作用。我们前期工作中沉默了DEPDC1在鼻咽癌细胞中的表达,发现细胞增殖抑制并诱发细胞凋亡。目的:本研究目的在于探讨沉默DEPDC1基因表达后,对鼻咽癌细胞系HNE-1和CNE-1的侵袭迁移能力的影响以及牵涉的相关分子机制。方法:(1)沉默DEPDC1基因对鼻咽癌细胞系HNE-1、CNE-1的侵袭迁移能力的影响:根据siRNA靶序列设计的方法及原则,设计针对DEPDC1基因的siRNA序列,转染入HNE-1、CNE-1细胞系中,通过荧光定量PCR检测DEPDC1基因的表达量;Western blot检测DEPDC1蛋白质的表达量;免疫荧光观察DEPDC1蛋白质的亚细胞定位;倒置显微镜下观察细胞形态的变化;划痕实验、侵袭迁移实验检测DEDPC1沉默表达后HNE-1及CNE-1的迁移能力;(2)DEPDC1基因表达下调影响细胞系HNE-1、CNE-1侵袭迁移的机制研究:采用荧光定量PCR、Western blot及细胞免疫荧光检测检测HNE-1、CNE-1细胞系中与EMT相关的分子在mRNA以及蛋白质水平的变化。结果:(1)siRNA介导DEPDC1表达沉默后,细胞的侧向运动能力、侵袭迁移能力显著降低。(2)RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光检测发现DEPDC1沉默导致EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子Vimentin表达显著下调。结论:这些研究结果表明,鼻咽癌细胞中DEPDC1通过调节Twist1等EMT相关的关键分子的表达,影响细胞的侵袭转移过程。因此推测DEPDC1在鼻咽癌细胞中高表达可能对于促进其侵袭转移过程具有重要作用,进而促进肿瘤的发生发展,但其牵涉的具体分子机制仍有待更深入研究。
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