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目的:癫痫是一种常见的神经系统疾病,全球患病率约1%。大部分患者用现有的抗癫痫药物能有效控制发作,但仍有20%~40%的癫痫患者治疗效果差,不能有效控制,称为难治性癫痫。颞叶癫痫作为最常见的难治性癫痫,其发病机制一直是癫痫研究的热点。谷氨酸是中枢神经系统最重要的兴奋性氨基酸,其受体N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)在癫痫尤其是颞叶癫痫的形成和发展起着非常重要的作用。驱动蛋白家族成员17(KIF17)是一种驱动蛋白,在成年脊椎动物神经系统中表达广泛,在神经细胞中沿微管向细胞膜运输NMDA受体的亚基NR2B,但其是否参与了颞叶癫痫的苔藓纤维出芽及突触重建尚未得知。本实验通过制备锂-匹罗卡品致痫大鼠模型,定量监测癫痫发作后不同时相点KIF17蛋白在海马和颞叶皮质表达的动态变化过程,探讨其在颞叶癫痫中的作用,为临床治疗难治性癫痫提供实验依据。方法:采用氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫大鼠模型,49只雄性健康Wistar大鼠采用随机数字表法分成实验组(n=42)和对照组(n=7),实验组又分为6个亚组包括癫痫后24h、72h、7d、14d、1个月,2个月(n=7)。运用蛋白质印记法检测KIF17在致痫大鼠海马和颞叶皮质的表达变化,免疫荧光双标染色法确定KIF17的表达部位。结果:1.行为学观察:氯化锂-匹罗卡品致痫动物模型行为学改变分为急性期、静止期和慢性期。大鼠在匹罗卡品注射后30min可出现行为学改变,包括:流涎、咀嚼、点头、前肢抽搐、跌倒等。大鼠的癫痫发作等级可按照Racine标准判断,仅IV级及以上发作可用于实验。2.蛋白质印迹:蛋白质印记法在大鼠海马中KIF17与β-action的积分光密度比值实验组分别为:0.5160±0.1961、0.7418±0.3134、0.8876±0.3192、0.7696±0.2713、0.7422±0.2610、0.7144±0.2708,同对照组(0.4948±0.2025)相比差异均有统计学意义(t值分别为:7.051、4.974、7.419、8.795、8.264、6.676,均P<0.05)。在大鼠颞叶皮质中KIF17与β-action的积分光密度比值实验组分别为:0.4165±0.1599、0.4736±0.1708、0.6365±0.2694、0.6247±0.2221、0.7997±0.3527、0.6523±0.2845,同对照组(0.3447±0.1441)相比差异均有统计学意义(t值分别为:5.722、9.016、4.872、7.808、4.791、4.846,均P<0.05)。KIF17蛋白表达在大鼠海马中实验组与对照组相比均增高,7d时最高,差异均有统计学意义(P<0.05);在颞叶皮质中实验组与对照组相比均增高,30d时最高,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.免疫荧光:为进一步探讨KIF17的细胞定位,将KIF17抗体分别和微管相关蛋白2(MAP2)抗体、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体、囊泡谷氨酸转运体1(BNPI)抗体、谷氨酸脱羧酶1(GAD67)抗体进行荧光双标。免疫荧光双标染色法显示KIF17蛋白主要存在于神经元,包括兴奋性神经元和抑制性神经元,而在星形胶质细胞中不表达。结论:1.KIF17在氯化锂-匹罗卡品诱导的慢性癫痫大鼠海马和颞叶皮质的表达量均增高。2.KIF17蛋白主要存在于神经元内,包括兴奋性神经元和抑制性神经元,在星形胶质细胞中不表达。3.KIF17在难治性癫痫的发生发展中可能起重要作用。