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研究目的旨在建立人类口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,0SCC )细胞系,确定其组织来源,并研究姜黄素对鳞癌细胞的相关毒性作用,对作用后的细胞形态、生长周期、核转录因子蛋白及细胞周期蛋白的表达等进行一系列生物学特性检测。研究方法①原代培养消化法将病理确诊的口腔鳞癌组织经胰蛋白酶、螯合剂(EDTA)作用,分散成单细胞悬液,加入含10%小牛血清的RPMI-1640培养基中,置5%CO2、37℃培养箱内孵育;②倒置显微镜下观察培养细胞的形态;③细胞类型鉴定免疫组织化学法检测培养细胞的CD44表达情况,以确定其组织和细胞来源;④将不同浓度的姜黄素加入处于生长指数期的鳞癌细胞中,作用24-48小时后检测药物对细胞的相关影响,包括细胞毒性作用、细胞形态变化、凋亡、生长周期及核转录因子蛋白、细胞周期蛋白表达的变化。⑤将药物作用前后的细胞形态在倒置相差显微镜下加以对照并存档。研究结果①成功培养口腔鳞癌原代细胞,镜下示肿瘤细胞呈多角形、短梭形;免疫组化示CD44表达阳性,结合病理活检结果,确定为鳞癌细胞;②5,10,20mg/L浓度的姜黄素具细胞毒性作用,24小时后即出现单位面积细胞数量减少、细胞间连接消失,胞体变小、变圆或形状不规则,核固缩,胞膜完整但出现发泡现象,出现凋亡小体等现象;③细胞生长增殖受限制,抑制率随药物浓度渐增加;流式分析仪测得细胞出现凋亡率,G2/M期发生阻滞,S及G2/M期比例渐增加,而G0/G1比例逐渐减少,上述变化均与药物浓度呈正相关;④NF-κB、cyclin D1阳性细胞数减少;与药物浓度呈负相关。研究结论①体外原代培养、传代的鳞癌细胞最大限度地保留了肿瘤细胞原组织的类型,表达原组织特性,可作为口腔颌面部鳞癌研究的体外实验细胞;②姜黄素抑制鳞癌细胞生长,加速细胞凋亡,阻止细胞进入有丝分裂的M期;减少鳞癌病变中NF—KappaB和Cyclin D1的表达,可作为口腔肿瘤的化学预防剂加以应用,为颌面部鳞癌的防治提供一种安全、有效的制剂。