产油微藻的高密度培养工艺研究

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维持微藻培养体系的长期稳定性是微藻培养的一个难题,它受很多因素的影响,如营养盐、自身生长抑制物、敌害生物等。微藻培养成本高是制约微藻产业发展的重要的因素,营养盐和水是影响培养成本的重要因素,所以传统培养中常常采用水循环培养的方式,但这也存在着很多问题,比如离子积累(如Na~+)等,本论文主要研究内容如下:(1)通过单因素实验,研究了各营养元素对二形栅藻生长的影响,发现,N、P是影响二形栅藻生长比较显著的因素,培养基中铵态氮浓度超过12mmo/L、磷源浓度大于65μmmol/L时,会对二形栅藻的生长产生抑制作用;综合考虑各种因素,氨氮浓度在4~8mmol/L时比较合适,磷浓度为16μmo/L时藻油脂产量达到最大值;Na不是藻生长的必需元素,但是在维持藻细胞渗透压方面起作用;二形栅藻能够耐受较高浓度的K、Ca、Fe,缺Mg的条件下,二形栅藻几乎不能生长,且高浓度的Mg,对二形栅藻的生长有一定影响,但不明显。(2)对二形栅藻的细胞元素分析,并基于栅藻细胞中各元素的含量比例设计了一个新的培养基,结果表明,新的培养基不仅节约培养成本,并且能够维持栅藻较好的生长。(3)对二形栅藻进行10批次的水循环培养,结果发现,栅藻的最终生物量随着培养批次的增加逐渐减低,表明栅藻生长的过程中产生了自身生长抑制物;对每批次结束时收获的藻液进行总有机碳的测定,并收集培养后期的藻液,通过高效液相色谱质谱联用系统对抑制物进行成分的鉴定,确定藻液中主要含分子量为624、642、656和1247的这几种物质。(4)研究了碳酸氢铵和次氯酸钠的杀虫效果,采用分批补加碳铵模式,如每天补加2mmol/L或隔天补加3.33mmol/L效果较好,不仅能够有效抑制虫子生长,且对二形栅藻生长不产生副作用。加入有效氯浓度大于等于8%的0.2mL/L NaClO,不仅能够有效杀虫,而且二形栅藻也能较快的恢复生长。
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