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背景:胰腺导管腺癌作为恶性程度最高的肿瘤之一,正在成为人类健康的重大威胁,有研究者预测在2030年会上升至肿瘤相关死亡的第二位。然而,过去30年的生存率改善有限,1975年、1995年和2012年的5年存活率分别为3%,3.6%和7.2%。即使接受了目前标准治疗程序一期手术和术后放化疗,患者的5年生存率仍低于30%。术后早期复发和肿瘤异质性是胰腺癌治疗效果不佳的二个主要原因。近年来新辅助治疗越来越多地用于胃肠道恶性肿瘤,因为它被认为可以减少肿瘤负荷,增加R0切除率并减少微转移。因此对PDAC患者术后早期复发及预后不佳的高风险亚组进行更好的分层是至关重要的。它可以避免早期复发的高危患者接受手术治疗,并可从其他术前新辅助治疗策略中受益。目前对胰腺癌术后早期复发的时间尚未有一个统一的认识,因此既往研究对早期复发高危因素的分析仅仅体现了各个不同的研究目的,并未真正寻找到术前相关的高危因素。既往的研究提示,肿瘤大小,CA19-9水平,肿瘤分级,切缘,淋巴结侵犯,神经侵犯,门静脉侵犯,以及全身免疫状态可能是有参考意义的预测早期复发和预后的主要危险因素。但上述很多指标无法在术前获取,因此尚无一个可靠的生物标志物或复发模型,可供临床治疗决策时参考;而且近年来随着二代测序技术的兴起和推广,亟需发现一个与预后相关的生物学标志物,在术前对胰腺癌患者进行更精准的分层。目的:确定胰腺癌术后早期复发时间的准确定义,并探讨导致术后早期复发的相关危险因素,建立术后早期复发的临床相关因素预测模型,以期在术前对胰腺癌患者进行更细致的分层,帮助进行治疗决策的制定;根据胰腺癌肿瘤组织靶向基因测序结果,建立中国胰腺癌基因突变图谱,并探讨几种常见突变与胰腺癌根治术后结局之间的相关性,为术前治疗决策提供参考。方法:第一部分:训练集样本来自xx医院胰腺外科2015年至2017年期间接受胰腺切除术(包括胰十二指肠术/胰体尾切除术（PD/DP）伴或不伴门静脉/肠系膜上静脉/腹腔动脉切除（PV/SMV/CA）的患者,并且在术后经病理确认为胰腺导管腺癌、侵袭性导管内乳头状粘液瘤（IPMN相关癌）、腺鳞癌和未分化癌。验证集样本来自外院2018年接受胰腺切除术的患者,手术方式及术后病理确认要求同训练集,并保证后续随访时间>6个月。从前瞻性数据库采集相关的术前、术后人口统计学、临床-病理-治疗信息,包括包括性别、年龄、主诉、体质指数BMI、家族肿瘤史、酗酒和吸烟史、糖尿病史、年龄调整的卡尔森共病指数、术前影像中肿瘤位置、术前影像学T分期、术前影像学中淋巴结是否肿大、术前影像学中肿瘤最大径、影像学可切除性评估、术前CEA和CA19-9、血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、单核细胞计数、手术时间及方式（是否合并血管切除吻合术）、肿瘤分化程度分级（好、中、差）、病理T分期、病理N分期、神经和淋巴血管周围侵犯、切缘、切除后辅助治疗、随访后记录复发部位和复发时间、死亡时间或末次随访时间。对上述资料进行统计学分析,其中使用最小P值法确定术后早期、中期、晚期/未复发时间的最佳临界值,采用卡方检验比较两组或三组之间的统计学差异;确定早期复发时间后,合并中期复发和晚期/未复发组为非早期复发组,采用Kaplan-Meier复发曲线计算所有术前因素的最佳临界值,并采用Log-Rank检验;在单因素分析中P值小于0.1的术前因素纳入COX比例风险模型;在COX比例风险模型中,筛选出P值小于0.05的术前因素以参与Nomogram的生成并使用外院的验证组进行验证。以上工作使用SPSS 23.0软件进行组间显著差异的比较、生存曲线及Log-Rank检验、COX比例风险模型;使用R3.5和第三方工具包（如grid和rms）生成Nomogram并进行验证。第二部分:样本来自xx医院胰腺外科2015年至2017年期间接受胰腺切除术（包括PD/DP伴或不伴PV/SMV/CA切除）的患者,并且在术后经病理确认为胰腺导管腺癌、腺鳞癌。手术切除样本经病理确认后进行靶向基因测序分析;从前瞻性数据库中提取人口统计学、临床-病理和治疗信息:包括性别、年龄、术前CA19-9、术前影像学中肿瘤位置、肿瘤分化程度分级（好、中、差）、病理T分期、病理N分期、淋巴血管侵犯、神经侵犯、切缘、随访后记录复发时间、死亡时间或末次随访时间。计算四种重要驱动基因的比例并与http://www.cbioportal.org官网下载ICGC、QCMG和UTSW三项研究共591例患者的前20位突变基因图谱进行了比较。选取资料完整的样本纳入后续生存分析。其中经单因素分析后,p<0.1变量纳入COX比例风险模型,使用多因素调整的COX比例风险模型,计算p值、风险比（HRs）和95%CI,来评估四种重要驱动基因改变与DFS、OS的相关性,并对突变数目和KRAS亚组进行单因素分析,P<0.05表示有统计学差异。上述分析工作选用SPSS 23.0软件进行统计学分析。结果:第一部分:1、入组患者一般情况:自2015年1月至2017年11月共324例患者纳入训练集,自2018年1月至2018年6月共68例纳入验证集。训练集在随访期间出现复发235例（72.53%）,中位复发时间为377天（95%CI 279.69-474.30）,中位生存时间为566天（95%455.08-676.91）。2、胰腺癌根治术后早期复发的最佳临界值为162天。3、与早期复发相关的变量有:腹痛或后背痛伴发黄疸、影像学中淋巴结肿大、影像学可切除性评估为BR或UR、术前CA19-9是否大于210k U/L、术前中性粒细胞-淋巴细胞比例（NLR）是否大于4.2,以上变量p值均<0.05。4、基于此五项危险因素构建的Nomogram图可预测胰腺癌患者术后的早期复发风险,并使用外院的病例进行了验证。第二部分:1、自2015年1月至2018年5月,共302例根治性手术后经病理确认胰腺导管腺癌及腺鳞癌患者接受了521个肿瘤相关基因深度测序,平均测序深度700×。其中四种重要突变KRAS、TP53、SMAD4、CDKN2A突变比例分别为262例（86.75%）、171例（56.62%）、51例（16.89%）、53例（17.55%）。在KRAS亚组中KRASG12D突变患者116例,KRASG12V突变患者105例,KRASG12C突变患者5例,KRAS其他位点突变患者36例。2、自2015年1月至2018年5月,共有150例患者纳入生存分析。经过p<0.1的临床病理因素包括术前CA19-9、肿瘤分化程度分级、神经浸润、脉管浸润、切缘等调整后,四个重要基因突变中与更差的无病生存时间相关仅有KRAS突变,p=0.025（HR 2.084,95%CI 1.099-3.952）,四种重要基因突变与总生存时间均无明显相关性。在单因素分析中,四个重要基因突变数目与无病生存时间、总生存时间无明显相关性,p值分别为0.353（HR 1.137,95%CI 0.866-1.493）和0.346（HR 1.140,95%CI 0.868-1.498）;KRASG12D突变患者的无病生存时间、总生存时间较KRAS其他突变和无KRAS突变的患者更差,p值分别为0.004（HR 2.589,95%CI1.361-4.924）和0.018（HR 2.548,95%CI 1.170-5.549）。结论:1、胰腺癌根治术后早期复发的最佳临界值为162天。2、胰腺癌根治术后的早期复发与腹痛或后背痛伴发黄疸、影像学中淋巴结肿大、影像学可切除性评估BR或UR、术前CA19-9是否大于210k U/L、术前中性粒细胞-淋巴细胞比例（NLR）是否大于4.2相关;基于此五项危险因素构建的Nomogram图可预测胰腺癌患者术后的早期复发风险,并进行了验证。3、302例中国胰腺癌患者的基因突变图谱,其中四种重要突变KRAS、TP53、SMAD4、CDKN2A突变比例分别为262例（86.75%）、171例（56.62%）、51例（16.89%）、53例（17.55%）,与西方人的结果是相似的。4、四个重要基因突变中仅有KRAS突变与更差的无病生存时间存在相关性。其中KRASG12D突变患者的无病生存时间、总生存时间较KRAS其他突变和无KRAS突变的患者更差。