EBL调控4℃胁迫下及恢复后沟叶结缕草愈伤组织的生长与再生

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低温是暖季型草坪草的主要胁迫因子之一。为了提高沟叶结缕草(Zoysia matrella(L.)Merr.)植株的抗寒性,利用体细胞无性系突变技术进行新品种的选育和遗传改良是一大研究方向。而针对沟叶结缕草愈伤组织抗寒性提升和抗寒再生植株筛选的研究尚属空白,结合目前的研究进展,本文对通过体细胞无性系筛选来提高愈沟叶结缕草抗寒性进行了试验和探讨。油菜素甾醇(BRs)广泛作用于植物生长调节和抗逆性提升,结合BR处理可以进一步了解BR对愈伤组织抗氧化酶体系的调节作用。试验通过测定和分析愈伤组织及再生植株在各浓度表油菜素内酯(EBL)处理下的生理和表观指标,对EBL提高沟叶结缕草愈伤组织耐寒能力进行了系统研究,研究结果如下:(1)4℃低温胁迫明显抑制沟叶结缕草愈伤组织生长和再生,降低其生物量增长。(2)沟叶结缕草愈伤组织具有一定耐寒性。胁迫早期愈伤组织对低温环境的生理响应迅速,其保护酶活性和丙二醛(MDA)含量均有较明显的动态变化。其中对继代培养的胁迫早期,其过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)酶活先降后升,呈现一致性;过氧化物酶(POD)持续下降;MDA持续上升。对再生培养的胁迫早期,CAT、POD、SOD均为先降后升;MDA持续上升。(3)冷胁迫恢复期间,愈伤组织体内抗氧化酶迅速上升,MDA含量持续下降。而随着恢复持续,抗氧化酶活性开始下降,植物进入正常生长发育阶段。(4)EBL通过调控沟叶结缕草愈伤组织抗氧化酶体系来缓解逆境伤害,一定浓度区间(0.01~0.1mg/L)的EBL显著提高愈伤组织CAT、POD、SOD活性,降低MDA含量,促进愈伤组织继代和再生的生长态势。(5)EBL通过调控沟叶结缕草愈伤组织抗氧化酶体系调节胁迫后的恢复情况,促进愈伤组织恢复继代增殖与再生分化。浓度范围在0.01~0.1 mg/L的EBL处理显著提高愈伤组织继代恢复,提高鲜重和直径增长,而0.5 mg/L EBL起抑制作用;浓度范围在0.01~0.05mg/L的EBL处理显著改善愈伤组织恢复再生情况,提高再生率,降低褐化率,其中0.05mg/L的EBL是改善再生恢复的最优浓度,而0.1mg/L及以上浓度的EBL对愈伤组织恢复再生起反作用。
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