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目的：研究我院及湖南省3家综合医院MRSA的分离率、β-内酰胺酶的检出率及14种抗生素药物敏感性，采用对比法研究MRSA的几种不同鉴定方法，研究我院住院患者与环境中分离MRSA的分布及同源性，我院不同年份住院患者分离MRSA同源性，湖南省4家综合医院之间MRSA的同源性，分析其分子流行病学特点，为临床治疗、预防、监测MRSA的流行，并制定合理的防治方案提供确实可靠的依据。方法：收集湘雅医院、湘雅三医院、郴州市一医院、株洲市一医院临床标本中分离的金黄色葡萄球菌110株，湘雅医院环境及工作人员手分离金黄色葡萄球菌30株。采用苯唑西林药敏纸片法、头孢西丁药敏纸片法及PCR检测MecA、FemA基因法对比检测MRSA；采用Nitrocephin试棒测定β-内酰胺酶的检出率；K-B纸片法进行14种抗生素药物敏感性试验；采用质粒图谱分析4家医院是否存在质粒流行，并分析其型别；采用RAPD分子生物学技术对我院住院患者与环境中分离MRSA进行同源性分析，对湖南省4家大型综合医院之间MRSA进行同源性分析。结果：1．140株金黄色葡萄球菌经苯唑西林(OX)及头孢西丁(FOX)药敏纸片法鉴定，对OX有90株耐药，1株中介，49株敏感，耐药率为64.29％；对FOX有89株耐药，51株敏感，耐药率为63.57％。用PCR方法进行检测有89株可同时检测到MecA基因和FemA基因。MRSA的标本来源，痰和创面分泌物两者占分离率的81.7％，分别为46.5％和35.2％。2．本实验中对比苯唑西林、头孢西丁药敏纸片法与MecA、FemA基因PCR法检测MRSA，X~2=0.015，p=0.9897，三种检测方法检测结果差异无显著性。3．K-B药敏纸片法进行14种抗生素药敏试验结果显示，89株MRSA对万古霉素和利奈唑胺100％敏感，对其他抗菌药物呈多重耐药。4．89株MRSA有85株产β-内酰胺酶，产酶率为95.50％。5．经质粒图谱分析MRSA所携带质粒可分为17型，4家医院MRSA均存在1-2种主要质粒的流行。6．经RAPD分型所有MRSA可分为A、B、C、D、E五型，其中A型85株占所有菌株的95.50％，B型1株，C型1株，D型1株，E型1株。我院住院患者与环境中分离MRSA，我院不同年份住院患者分离MRSA，以及湖南省4家综合医院之间MRSA感染菌株具有同源性。结论：1．苯唑西林及头孢西丁药敏纸片法实验操作简便，均可快速、准确地检测出MRSA，其中头孢西丁药敏纸片法特异性更高。MecA、FemA基因联合扩增可准确、有效地检测出MRSA，较两基因分别扩增法简便。2．89株MRSA95.50％检测到β-内酰胺酶，其产酶率较高。3．MRSA除对万古霉素和利奈唑胺敏感外，呈多重耐药。4．质粒图谱分析及RAPD分型方法可很好用于MRSA分子流行病学分析，我院MRSA临床株与环境株具有同源性，湖南省4家综合医院之间MRSA菌株具有同源性，呈暴发流行。