论文部分内容阅读
研究目的:探讨抑癌基因VHL及其下游调控基因HIF-1α和VEGF在骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病患者中的表达情况,分析VHL基因与HIF-1a、VEGF基因表达相关性,并与血液学、细胞遗传学资料结合分析,了解其意义及为寻找靶向治疗点提供实验依据。研究方法:1、研究对象:2012年5月至2013年2月福建医科大学附属协和医院血液科及门诊病人骨髓标本51例,其中AML患者35例(27例初治、8例缓解)MDS患者16例(5例中危-II/高危-以下A组表示、11例低危/中危-I-以下B组表示)及10例正常人。27例初治患者核型(10例正常、14例异常、3例未获得),16例MDS患者核型中(2例正常、3例异常、其余均未获得)。2、收集研究对象骨髓单个核细胞,提取总RNA并逆转录,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Q-RT-PCR)对骨髓血单个核细胞进行VHL、HIF-1a、VEGF基因mRNA水平的检测,同时以GAPDH为内参照。3、数据分析采用统计学软件包SPSSl7.0及Graphad Prism5进行,计数资料用mean±SD表示,两组样本均数间比较采用Wilcoxon秩和检验,计量资料用卡方检验,两变量间相关性分析采用Spearman秩相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。实验结果:1、VHL基因表达情况:初治AML患者VHL基因mRNA的表达显著低于A组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B组VHL基因mRNA的表达高于A组,低于正常对照组, AML缓解组VHL基因mRNA的表达高于AML初治组,低于正常对照组,但差异无统计学意义。2、HIF-1a基因表达情况:初治AML患者组与A组HIF-1a基因mRNA的表达均显著高于正常对照组, B组HIF-1a基因mRNA的表达低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);而AML缓解组HIF-1a基因mRNA的表达低于AML初治组,高于正常对照组,但差异无统计学意义。3、VEGF基因表达情况:所有实验组及正常对照组VEGF基因mRNA的表达各组间比较均无统计学差异。4、染色体核型与VHL、HIF-1a、VEGF基因表达情况相关分析:染色体核型分析显示染色体异常组与正常组比较,VHL、HIF-1a、VEGF基因mRNA的表达无统计学差异。5、VHL与HIF-1a表达相关分析:AML初治患者组VHL与HIF-1a呈显著正相关(P<0.01),MDS患者组及AML缓解组无明显相关性。6、所有实验组及对照组VHL、HIF-1a、VEGF与外周血白细胞计数、幼稚细胞百分比无明显相关性。结论:VHL基因mRNA在AML及MDS患者中低表达,可能与MDS进展为AML及危险分层有关;AML及MDS患者中HIF-1a、VEGF基因mRNA高表达;在转录水平上,AML患者VHL与HIF-1a mRNA的表达呈正相关关系。