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罗汉松(Podocarpus macrophyllus),又名罗汉杉、土杉,是一种小型到中型的常绿乔木。由于罗汉松树形雅致,种子与种柄组合独特,惹人喜爱,常栽培于庭园作观赏树。罗汉松含有挥发油、二萜类、降二萜内酯、黄酮类和酚类化合物。罗汉松在民间经常入药使用,因其有广泛的药理活性,如抗氧化、抗肿瘤、抗炎及保护血液系统和神经系统等药理功能。近年来,关于罗汉松的研究,国内外学者主要集中在其快速繁殖技术及遗传多样化方面。有关罗汉松的化学成分特别是挥发油类化合物的提取,成分分析及生物活性的研究较少。本文充分利用了周边丰富的罗汉松枝叶资源,对其中挥发油的提取进行深入研究,有效利用资源,增加罗汉松的经济附加值,为罗汉松的综合开发利用提供理论基础。1.建立了水蒸气蒸馏法提取罗汉松枝叶挥发油的方法,在单因素基础上通过四因素三水平响应面实验得出对罗汉松枝叶挥发油的最佳条件为:浸泡时间3h,液料比4:1(mL/g)、氯化钠溶液浓度4%、蒸馏时间4h,在此条件下罗汉松枝叶挥发油得率为1.09%。在质谱图中共鉴定出其中19个化合物约占色谱面积96.58%。萜烯类及其含氧衍生物共14种,占总含量的78.23%,其中萜醇类化合物3种;萜醛类化合物3种。脂肪族化合物5种,占总含量的18.35%,其中酯类化合物2种,酸类化合物3种。提取得到的挥发油中主要成分为石竹烯、α-蒎烯和β-蒎烯,含量分别为21.83%、6.72%和5.97%。其中含量较少的为柠檬醛、莰烯和顺式-β-罗勒烯,含量分别为1.36%、2.11%、2.12%。2.建立了微胶囊双水相法提取罗汉松枝叶挥发油的方法,经过筛选确认了以β-环糊精-硫酸钠体系,单因素基础上通过四因素三水平响应面实验得出对罗汉松枝叶挥发油的最佳条件为萃取时间35min,β-环糊精浓度40%,硫酸钠浓度15%,萃取温度30℃,在此条件下罗汉松枝叶挥发油得率为1.372%。在质谱图中共鉴定出其中22个化合物约占色谱面积93.72%。萜烯及其含氧衍生物18种,占总含量的73.74%,其中萜醇类化合物4种,萜醛类化合物2种,脂肪族化合物4种,占含量的19.98%,其中酯类化合物2种,酸类化合物2种。提取得到的挥发油中主要成分为石竹烯、α-蒎烯和β-蒎烯,含量分别为17.62%、9.78%和7.47%。其中含量较少的为月桂烯醇、顺式-β-罗勒烯和桉叶油素,含量分别为1.01%、0.78%、1.02%。3.采用了紫外分光光度法检测罗汉松总黄酮的方法,为探索闪式提取法对罗汉松总黄酮的影响,经单因素和响应面实验优化得到闪式提取罗汉松总黄酮的最佳工艺条件,单因素基础上通过四因素三水平响应面实验得出闪式提取法对罗汉松总黄酮的最佳条件为:乙醇体积分数71%、液料比36:1(mL/g)、提取时间53 s、提取电压为75 V,在此条件下罗汉松总黄酮得率为8.147%。4.以VC、VE为对照,分别考察了罗汉松枝叶挥发油和总黄酮对·DPPH、·O2-和·OH 3种自由基的清除能力。结果表明,挥发油和总黄酮均对自由基清除呈良好线性关系,当挥发油浓度为0.39mg/L时,对·DPPH、·O2-和·OH自由基的清除率分别达到最大为79.87%、42.78%和61.34%,当总黄酮质量浓度为0.42mg/L时,对·DPPH、·O2-和·OH自由基的清除率分别达到最大为87.13%、58.24%和67.56%,表明罗汉松枝叶挥发油和总黄酮具有良好的体外抗氧化作用。