基因的表达调控是生物体内最重要的生命活动过程之一,其表达调控机制一直以来都是研究的热点。启动子作为调控基因表达的重要元件,它启动基因的表达,决定了不同基因表达的强度、时间和空间上的差异,从而直接影响生物体性状的形成及其对外界环境的适应性。橡胶树白粉菌(Oidium heveae)侵染引起的橡胶树白粉病是橡胶树重要的叶部病害。橡胶树白粉菌具有专性寄生、遗传背景复杂的特点,在启动子方面的研究未见报道。对橡胶树白粉菌启动子的研究将有助于提升我们对该菌基因调控机制的理解,从橡胶树白粉菌中筛选新型强启动子或特异性启动子对实现外源基因高效、特异性表达具有较大的意义。本研究获得的主要研究结果如下:(1)构建了启动子探针载体PUC19-K,该载体以卡那霉素为标记,适合真核生物启动子的活性筛选鉴定。(2)利用生物信息学和启动子探针载体筛选方法,基于前期橡胶树白粉病菌全基因组的测序基础,预测得到90个具有启动子活性的核心序列,利用启动子探针载体初步筛选获得4个具有启动子活性的启动子,分别命名为LY1、LY2、LY3、LY4。同时以CaMV35S为参照对含各启动子的菌株进行卡那霉素耐受性试验,初步判断这些启动子活性由强到弱依次为LY2≈LY3>LY1>LY4>CaMV35S。其中LY2启动子含有10个启动活性增强元件,1个生长素响应元件,2个光诱导响应元件,其启动活性增强元件数量最多。(3)验证了 启动子上启动活性增强元件数量与启动子活性的关系。构建了含有不同数量活性增强元件的启动子,测定它们对GUS基因瞬时表达的调控活性。这些启动子分别为LY2c1(含有1个启动活性增强元件)、LY2c2(含有5个启动活性增强元件、1个生长素响应元件和2个光诱导响应元件)、LY2c3(含有10个启动活性增强元件、1个生长素响应元件和2个光诱导响应元件),结果显示,启动活性强度由强到弱为LY2c3>CaMV35S>LY2c2LY2c1。(4)验证了 启动子上的诱导响应元件的诱导功能。将LY2c3、LY2c2、LY2c1启动子与GUS基因连接,分别用生长素IAA和暗诱导处理,了解GUS在烟草中瞬时表达情况,GUS活性检测结果显示含有生长素或光诱导响应元件的启动子LY2c2、LY2c3都能响应相应的诱导而调控GUS表达活性增强,而不含有诱导相应元件的LY2c1启动子不能响应相应诱导处理。综上所述,本研究筛选获得来自橡胶树白粉病菌的LY2启动子,其启动活性强于CaMV35S启动子,且兼具有IAA和光诱导响应特性。该研究可为进一步揭示基因表达调控机制奠定了良好基础,具有一定的理论意义和应用前景。