【摘 要】
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本研究克隆了烟草诱导型启动子hsr203J及花生几丁质酶基因（Ah-chi）全长cDNA序列。将hsr203J替换掉pCAMBIA1301上的CaMV35S启动子，用Ah-chi替换掉pCAMBIA1301上的GUS基因，构建了hs
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本研究克隆了烟草诱导型启动子hsr203J及花生几丁质酶基因（Ah-chi）全长cDNA序列。将hsr203J替换掉pCAMBIA1301上的CaMV35S启动子，用Ah-chi替换掉pCAMBIA1301上的GUS基因，构建了hsr203J启动子驱动的Ah-chi的植物表达载体。分别通过农杆菌介导法和花粉管注射法转化花生，获得了转基因植株，PCR扩增结果表明hsr203J及Ah-chi均已成功导入到花生中。主要研究结果如下:
1.从烟草中克隆得到病原物诱导型启动子hsr203J，该片段大小为1153bp，与GenBank中已注册的序列（序列号:X77136）同源性为99.83％，虽有3个碱基的突变，但突变均未发生在启动子序列的关键调控活性区域。
2.提取花生叶片总RNA，根据GenBank中已注册的序列（序列号:X82330）设计特异引物扩增得到花生几丁质酶基因全长cDNA，经测序分析知该片段长899bp，与GenBank中已注册序列同源性为100％，该序列已在GenBank上登记(HQ439775)。
3.将hsr203J替换掉pCAMBIA1301上的CaMV35S启动子，用Ah-chi替换掉pCAMBIA1301上的GUS基因，分别成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-hsr203J、pCAMBIA1301-Chi和pCAMBIA1301-hsr203J-Chi。
4.用农杆菌介导法和花粉管注射法将各表达载体转化花生，均获得了分别含pCAMBIA1301-hsr203J和pCAMBIA1301-Ci的抗性植株，PCR扩增结果表明目的基因均已转入花生。
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