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植物内生菌是一个庞大的具有普遍存在性的微生物特殊类群。近年来,研究表明植物中内生菌能产生抗肿瘤、杀菌等特殊活性物质,这使得植物内生菌的应用范围不断扩展,同时也成为药物研究一个新的热点。本论文是在抗结核分枝杆菌的植物内生菌筛选的基础上,根据“一菌多筛”的原则,扩展为具有抑菌活性的植物内生菌筛选及其活性菌株发酵优化。论文进行了植物样本表面消毒、内生菌分离纯化、发酵及发酵产物预处理、抗菌活性菌株筛选、活性菌株鉴定及其发酵条件优化等研究。获得的主要结果如下: 1植物内生菌的分离纯化采用已优化的表面消毒方法对30种植物样本进行处理,分离得到46株内生菌。但9株(3株真菌,6株细菌)不能在体外培养,另有7株内生真菌在本实验特定的人工培养条件下不产生有性分生孢子。2抗菌活性植物内生菌的筛选①得到菌丝预处理丙酮样本37份,乙酸乙酯样本37份;采用酒精沉淀法对发酵液进行预处理,得到样本37份。②采用定量的二倍稀释法(培养基采用改良罗氏斜面培养基)对111份预处理样本进行初筛,得到来源于商陆(Phytolacca acinosa)的EP-S23,狭叶十大功劳(Mahonia fortunei)EM-L40、香樟(Cinnamomum camphora (Linn.)Presl)EC-S44的3株活性内生真菌,其发酵液提取物浓度为10mg/ml时对人型结核标准菌株(H37Rv)有抑制作用。其中,EC-S44的发酵液提取物浓度在15mg/ml时对人型结核耐药菌株有抑制生长作用。③采用KB纸片法对以上3株菌进行复筛,得到香樟内生菌EC-S44发酵液提取物浓度为10mg/ml时对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、大肠杆菌均有不同程度抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌圈到达16mm,同时用琼脂二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC值)为6.5mg/ml。3活性菌株的鉴定和发酵条件优化①通过初步形态学鉴定:香樟(Cinnamomum camphora (Linn.)Presl)EC-S44为镰孢霉属(Fusarium),将其命名为Fusarium sp.菌株EC-S44。②对Fusarium sp.菌株EC-S44发酵条件进行优化,得到其在本实验中的最优发酵条件:土豆汁培养基(3%的葡萄糖、0.3%的牛肉膏),4%发酵接种量,20%的装液量,8.0的初始pH值,26℃培养温度,150rpm转速。在此条件下,菌株对结核分枝杆菌耐药株的抑制能力增强,MIC值降低到12.5mg/ml。