福建古田红曲米天然产物的分离纯化、结构鉴定与活性研究

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红曲米作为一种药食两用的米曲,因其含有降血压、降血脂、降血糖等功能活性物质,深受人们的喜爱。红曲中这些活性物质应用广泛,虽然已有较多代谢产物被分离鉴定,但其它具有抑菌、抗氧化及抗肿瘤等活性作用的天然产物研究仍有一定意义。本文以福建古田红曲为研究对象,初步对比了古田红曲与其它产地红曲及古田红曲不同有机溶剂提取物化学成分的相似度,并探究红曲粗提物的抑菌、抗氧化和体外细胞毒活性,并以此为依据,对从古田红曲提取物中分离纯化获得的活性物质进行结构鉴定,进而研究纯化得到的化合物的抑菌、抗氧化和抗肿瘤活性。主要研究成果如下:(1)通过优化HPLC色谱分析条件,建立了不同地区红曲以及古田红曲不同有机溶剂提取物的液相指纹图谱;以指纹图谱相似度评价系统计算相似度,结果显示,在302 nm波长下,福建古田红曲与浙江丽水以及广东梅州红曲化学成分差异明显,且古田红曲的甲醇提取物与乙酸乙酯、石油醚提取物化学成分也差异显著。(2)红曲粗提物抑菌实验表明福建古田红曲不同有机溶剂提取物的抑菌效果之间差异显著,同浓度下,各菌种对红曲粗提物敏感性从强到弱依次为枯草芽孢杆菌>大肠杆菌>黑曲霉>塔宾曲霉>酿酒酵母菌。抗氧化实验表明古田红曲甲醇提取物比其它产地红曲甲醇提取物具有更强的清除DPPH自由基能力;与其它溶剂相比,乙酸乙酯提取物的抗氧化效果较好。细胞毒活性实验结果显示只有丙酮和乙醇提取物对LO2细胞的增殖呈现一定的抑制作用;红曲粗提物在一定程度上能够抑制HepG2细胞的增殖,对HepG2细胞具有一定的细胞毒作用。(3)从福建古田红曲甲醇和石油醚提取物中共分离到12个化合物,经过核磁共振、质谱等波谱学方法测定,并对数据进行分析比对,鉴定化合物分别为棕榈酸、亚油酸、α-亚麻酸、油酸甲酯、芥酸酰胺、三油酸甘油酯、油酸、邻苯二甲酸二癸酯、芥酸、十五烷酸甲酯、邻苯二甲酸二丁酯和孕烯醇酮。(4)抑菌、抗氧化及体外细胞毒活性实验结果显示:在40 mg/mL浓度下,α-亚麻酸、邻苯二甲酸二癸酯、邻苯二甲酸二丁酯、亚油酸和三油酸甘油酯对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有一定的抑菌效果。α-亚麻酸、亚油酸、油酸对DPPH自由基均有一定的清除能力。体外细胞实验显示,在3.125-100.00μg/m L的浓度范围内,棕榈酸、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二癸酯、十五烷酸甲酯、α-亚麻酸对HepG2细胞均有一定的细胞毒作用。本文的研究结果可为开发具有延缓衰老、抗肿瘤等作用的新药研究奠定基础,为红曲中天然产物的食疗和药用研究提供一定的参考作用。
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