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目的:观察补肾活血法对体外培养的视网膜M(u|¨)ller细胞在缺氧及TGF-β2干预下的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:1.利用改进的酶消化法培养新生SD大鼠视网膜M(u|¨)ller细胞。2.在培养液中加入连二亚硫酸钠(终浓度为1.0mmol/L)造成细胞缺氧损伤模型。3.以透射电镜观察视网膜M(u|¨)ller细胞超微结构。4.以酶联免疫检测仪测定视网膜M(u|¨)ller细胞谷氨酰胺合成酶活性和乳酸脱氢酶漏出量。5.根据[3H]标记的D,L-谷氨酸摄入量判断视网膜M(u|¨)ller细胞的Glu的摄取功能。结果:1.缺氧条件下视网膜M(u|¨)ller细胞超微结构发生明显的病理损害,BSHX中药血清能明显减轻该种病理损害。2.缺氧条件下,视网膜M(u|¨)ller细胞的GS活性在24h和48h时段均比正常条件下明显降低;TGF-β2加重缺氧条件下视网膜M(u|¨)ller细胞GS活性的降低。BSHX中药血清能明显减轻缺氧和(或)TGF-β2条件下视网膜M(u|¨)ller细胞GS活性的降低。3.缺氧使视网膜M(u|¨)ller细胞活力降低,TGF-β2加重缺氧条件下视网膜M(u|¨)ller细胞活力的降低。BSHX中药血清能减轻TGF-β2和(或)模拟缺氧条件下视网膜M(u|¨)ller细胞活力的降低。4.缺氧条件下视网膜M(u|¨)ller细胞Glu摄入量增加,BSHX中药血清能增加正常情况下Glu摄入量,但是在TGF-β2和缺氧条件下Glu摄入量却降低。结论:1.BSHX中药血清能减轻缺氧条件下M(u|¨)ller细胞器的损伤。2.BSHX中药血清可以提高缺氧和(或)TGF-β2条件下视网膜M(u|¨)ller细胞GS的活性、增加细胞活力,这可能是补肾活血法防治DR的干预途径之一。3.在缺氧和TGF-β2同时存在条件下,BSHX中药血清下调视网膜M(u|¨)ller细胞的Glu摄取能力可能是在单种细胞环境中M(u|¨)ller细胞的一种自我保护作用。