绞股蓝Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino系葫芦科Cucurbitaceae绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物,全草入药。绞股蓝多糖作为绞股蓝植物中较高活性成分之一,引起了国内外很多学者的重视。研究表明,绞股蓝多糖具有明显的抗肿瘤、增强免疫力,降血压、血脂,抗氧化等作用。本实验主要对野生绞股蓝多糖的提取、分离纯化、检测及抗氧化活性等方面进行了深入研究。通过水提醇沉的方法优化提取工艺,采用一系列分离纯化手段,得到两个精制的多糖组份,对其进行初步的结构分析及活性研究。主要研究结果如下：1.分别采用热水浸提法、微波法和超声波法提取绞股蓝的多糖成分,以单因素和正交试验法对料液比、提取温度(微波功率、超声波功率)、提取时间和提取次数进行参数优化,确定对粗多糖提取率的影响大小。结果表明：传统的热水浸提法最佳工艺为温度100℃、提取2次、料液比1：20、提取时间2h；微波法最佳提取工艺为微波功率800W、提取2次、料液比1：35、提取时间15min;超声波法最佳提取工艺为超声波功率900W、提取次数2次、料液比1：25、提取时间40min。三种提取方法均能有效地提取出多糖成分,其中微波法提取效率最高,最佳工艺下的提取率达到了8.61%,且耗费时间最短,只用了15 min,效果最为明显。传统的热水提取效率最低,最佳提取工艺下的提取率只有6.35%。2.分别采用Sevag法、木瓜蛋白酶-Sevag法和TCA-Sevag法对绞股蓝多糖脱蛋白工艺进行优化。采用活性炭吸附法、H202脱色法、DA201-C吸附树脂脱色法,对绞股蓝粗多糖的脱色工艺进行优化。采用DEAE-52纤维素柱层析对脱蛋白、脱色得到的多糖进一步纯化,得到了四个洗脱峰。对其中组份较多的0.05M和0.3M NaCl洗脱组份进一步采用G-200葡聚糖凝胶柱层析纯化,水洗得到均一的洗脱峰。结果表明：木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白效果最佳,累计2次,蛋白脱除率可达63.08%,多糖保留率为77.34%。DA201-C吸附树脂脱色法效果最好,在最大程度去除色素的前提下,使多糖的损失量降到最低。树脂用量为1：20,温度50℃C,吸附4h,脱色率可达71.13%,多糖损失率只有19.90%。柱层析得到了两个均一的洗脱峰,透析冻干,得两个精制多糖组份,分别命名为GPM-1和GPM-2。3.分别对两个精制多糖组分理化性质和相对分子质量进行测定。采用红外光谱对两种多糖的糖键构型进行扫描,采用气相色谱对多糖的单糖组成及摩尔比进行测定和计算,采用环境电子扫描显微镜对两个精制多糖的表面和形态进行观察。结果表明：两个精制多糖组分都不含淀粉、糖醛酸、蛋白质、氨基酸、多肽和核酸等杂质。高效液相凝胶色谱法测定GPM-1和GPM-2的相对分子质量分别为200576和166861。红外光谱分析两种多糖均具有多糖类物质的特征吸收峰。气相色谱分析GPM-1的单糖组成摩尔比为鼠李糖：阿拉伯糖：木糖：甘露糖：葡萄糖：半乳糖=1.78：1.99：1.00：1.11：6.00：6.89,其中半乳糖的含量最高。多糖GPM-2的单糖组成摩尔比为鼠李糖：阿拉伯糖：木糖：甘露糖：葡萄糖：半乳糖=3..23：7.70：1.00：2.29：2.88：14.82,其中半乳糖的含量明显高于其他单糖含量。环境电子扫描显微镜观察两糖分别为碎屑状和层片状分布。4.分别研究了多糖GPM-1和GPM-2对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、·OH自由基的清除作用。结果显示：GPM-1和GPM-2均对自由基有一定的清除作用,且呈现良好的量效关系,但都不及Vc对·OH自由基的清除作用。其中对·OH自由基的清除作用非常明显。在浓度为3.0mg/mL时,多糖GPM-1和GPM-2对·OH自由基的清除率分别达到了72.9%和77.3%。实验也表明了绞股蓝多糖在清除·OH自由基方面有很好的潜力,同时也说明了绞股蓝多糖具有良好的抗氧化作用。