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肝癌是常见的病死率较高的恶性肿瘤,全身化疗是中晚期癌症患者的主要治疗方法,但全身化疗药物选择性低,毒副反应大,疗效差。载药纳米药物投递系统是近年来新兴的药物靶向运送制剂,它借助于安全无毒的各种运送载体,采用特殊工艺方法制备纳米级别的药物微球;纳米药物微球具有靶向传递、可控缓慢释放、增强药效及降低毒副反应等特点,有望成为癌症组织的靶向化疗制剂。本课题旨在制备载阿霉素纳米微球,研究探讨其性质表征、制备工艺及体外细胞毒作用,为纳米药物载体制剂的研究及开发提供一定的实验基础。目的制备载阿霉素乳酸羟基乙酸共聚物PLGA纳米微球(ADM-PLGA-NP),分析表征其一般理化性质及缓释特点,探讨研究其对体外培养的肝癌细胞系HepG2的细胞毒作用。方法1.采用改良的W/O/W复乳溶剂蒸发法制备ADM-PLGA-NP,场发射扫描电镜观察微球形态,激光衍射粒度分析仪检测微球粒径分布及多分散性,紫外分光光度法计算载药率及包封率,体外药物释放实验考察微球对ADM的缓释规律;2. HepG2细胞分别与ADM原药和载药纳米微球ADM-PLGA-NP(根据体外药物释药曲线计算出释药量)共培养一定时间后,相差倒置显微镜观察给药后的细胞形态的变化,噻唑蓝(MTT)比色法评价ADM-PLGA-NP的细胞毒作用,荧光显微镜观察细胞对ADM-PLGA-NP的吞噬摄取,流式细胞术半定量细胞内的阿霉素药物含量,研究ADM原药和载药纳米微球ADM-PLGA-NP的细胞摄取量及细胞毒性差异。结果1.制备的ADM-PLGA-NP外观呈圆整球形,无明显粘连;平均粒径约237±12.7nm,大小均匀,分布范围窄,多分散性指数为0.022;载药量及包封率分别为1.42±0.67 %和23.82±8.34 %;药物在体外缓慢释放,12h内呈突释,突释量达药物总量的55%,5d累积释放量达85%。2.ADM原药和载药纳米微球ADM-PLGA-NP分别与HepG2细胞共培养后,相差倒置显微镜观察示细胞贴壁能力减弱,胞质固缩,甚至死亡;MTT实验示空白微球对HepG2细胞的平均增殖抑制率为5.98±2.96%;ADM-PLGA-NP和ADM原药均能抑制HepG2细胞增殖,ADM原药的细胞抑制增殖率较ADM-PLGA-NP低(p<0.05);荧光显微镜观察到ADM-PLGA-NP被细胞吞噬后ADM发出红色荧光;流式细胞术半定量显示,ADM-PLGA-NP较ADM原药在细胞内有更强的ADM药物分子荧光强度。结论利用复乳溶剂蒸发法制备的ADM-PLGA-NP性质稳定,表征满意,具有药物缓释性。ADM-PLGA-NP可以被HepG2细胞吞噬摄取,ADM从微球中缓慢释放,较ADM原药可更有效地抑制肝癌细胞的生长。ADM-PLGA-NP有望成为一种新型的药物化疗制剂。