Ox-LDL对大鼠心肌细胞表达SCF的影响

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目的:本实验通过检测氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠心肌细胞中干细胞因子(SCF)表达的影响,从而为明了ox-LDL在心肌梗死后干细胞归巢并修复心肌梗死过程中的作用提供依据。方法:用超速离心法从正常人血浆中分离出低密度脂蛋白后,用Cu2+使之氧化成氧化型低密度脂蛋白。从新生大鼠心脏中分离出心肌细胞,于不同时间点(0h,1h,6h,12h,24h)在培养基中分别加入终浓度为25μg·ml的氧化低密度脂蛋白和低密度脂蛋白,用RT-PCR检测心肌细胞中SCF mRNA的表达;用细胞免疫组织化学和Western blotting的方法检测NF-κB的活性。结果:(1)RT-PCR结果显示:与相同浓度的低密度脂蛋白相比,25μg·ml的氧化低密度脂蛋白明显地抑制了大鼠心肌细胞中SCF的表达(与对照组相比,P<0.05),呈时间依赖性。(2)细胞免疫组化与Western蛋白印迹结果均显示,与未加任何处理因素的空白对照组相比,LPS能明显诱导NF-κB P65细胞内核转位,但LPS+ox-LDL组中NF-κB P65核转位明显抑制。结论:氧化低密度脂蛋白通过抑制细胞内NF-κB的活性,从而抑制了大鼠心肌细胞中SCF的表达,进而影响了心肌梗死后干细胞的归巢。
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