单克隆抗体LC-1的可变区基因的克隆及序列测定与分析

来源 :中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songyc198610712
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
该实验室获得的抗人肺癌的单克隆抗体LC-1ⅰ1ⅱ,不但在体外与肺癌细胞的结合有较强的特异性和亲和性,而且在动物模型及临床研究中都能实现对肿瘤的特异性定位ⅰ2-4ⅱ.历年来的研究表明:单抗LC-1具有作为肺癌病理诊断与鉴别诊断的辅助工具的潜力,有望成为肺癌病理诊断与鉴别诊断的主要辅助手段.然而,一方面由于单抗LC-1为IgM型五聚体,分子量很大;另一方面单抗LC-1为鼠源抗体在人体内可能会引起HAMA反应,这在一定程度上限制了它在临床中的应用.自从基因工程抗体的技术发展以来,抗体的人源化及片段化使得抗体分子在临床研究中的生物学性能大大改善ⅰ5ⅱ.通过抗体基因工程技术,可以获得其可变区基因片段,并由此可构建不同分子大小的的小分子抗体,如:Feb、ScFv等.该文应用分子生物学技术,从分泌LC-1的杂交瘤细胞中提取总RNA,并经过反转录、PCR分别克隆得轻链可变区(V<,L>)基因及重链可变区(V<,H>)基因.通过序列测定对V<,H>、V<,L>区基因进行了分析,并在所推导的氨基酸序列的基础上,对LC-1的可变区在生理条件下的带电情况进行了分析.结果表明:LC-1的V<,H>基因为为359bp,V<,L>基因为337bp;从推导出的氨基酸序列分析,证实它们均符合小鼠抗体可变区的氨基酸序列特征;根据Kabat分类体系,LC-1的V<,H>gene segment隶属于抗体重链第5个家族,其V<,L>gene segment隶属于抗体轻链的Vκ21家族;从蛋白的带电情况来看,LC-1的重链可变区的等电点为8.19,其轻链可变区的等电点为4.94.该研究从分泌LC-1的杂交瘤细胞提取总RNA开始,克隆并通过测序,测定其可变区基因;推导并分析其相应的蛋白质一级结构特征,为其嵌合抗体的构建及进一步的导向治疗研究提供了基础.
其他文献
学位
生态旅游以其显著地经济贡献日益被视为一个社区发展的有效途径。对环境敏感、富有教育意义且有利于当地社区的旅游需求的增加使生态旅游业正在日益普及。总的来说,像其他发
针对目前电网中中压配电线路线损过大、供电可靠性不高等问题,依据实际情况将中压配电线路按接线模式进行分类并制定了简便易行的准则对线路的负载率指标进行评价,将不满足指标的线路筛选出来,并进行改造方式的专家干预与改造实施风险的判断,以便选出实际工程中最可能采用的改造方式:包括更换为大截面导线、线路切改、双电源供电改造、配电室切改、增加线路间的联络等。在10kV配电线路改造中,如何确定线路的改造方案,使其
本文通过对荣华二采区10
哮喘气道高反应性(BHR)中,气道平滑肌痉挛性收缩是一重要的特征性病变,在哮喘发病中起着举足轻重的作用.而平滑肌的痉挛收缩与细胞膜电位及离子通道的关系密切.由于膜片钳技
截至2008年12月,浙江省境内实现境外上市的企业总计约有40家,首发募集资金合计约355亿元人民币,极大地支持了境内企业的发展。 As of December 2008, the total number of o
“中国市场经济地位”的问题,对中欧经贸关系的深刻意蕴,如同一盘跌宕起伏、难以终结的棋局,此中微妙,难以尽言。近年来,美国正在绕开世贸组织,筹建以“跨大西洋贸易与投资伙
学位
分析了原始阔叶红松林、落叶松天然林的植物群落结构特征;研究了落叶松人工林群落结构,及其生态稳定性;分析了暗棕壤的潜在供肥能力和现实供肥水平;测算了落叶松人工林生长和
该课题研究的主要内容是从微生物的代谢产物中,寻找新的抗疟药物.研究的重点,首先,是筛选与Artemisinin类似分子中含有过氧基团结构的化合物.其次,对血红素依赖的游离基的产