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目的探讨缺氧/复氧诱导PC12细胞凋亡与mTOR/p70S6K通路的关系。方法将体外培养PC12细胞用50ng/ml NGF诱导分化,在倒置相差显微镜下观察细胞形态,当细胞的神经突起长度超过胞体直径两倍以上时确定为分化细胞。分化6天后的细胞用于实验。将分化后的PC12细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组；抗氧化剂NAC处理组、mTOR抑制剂雷帕霉素处理组、单独使用NAC组以及单独使用雷帕霉素组。抗氧化剂NAC处理组将PC12细胞先加5mM NAC孵育1h再做缺氧/复氧处理,mTOR抑制剂雷帕霉素处理组将PC12细胞先加3μM雷帕霉素孵育1h再做缺氧/复氧处理,单独使用NAC和雷帕霉素组不做缺氧/复氧处理。应用MTT法检测细胞活性,Hoechst33342染色检测细胞凋亡率,用活性氧试剂盒检测细胞内ROS生成,Western blot检测mTOR通路相关信号蛋白(p-p70S6K)的表达变化。数据统计采用SPSS13.0软件包进行统计学处理。结果1.NGF诱导可使PC12细胞分化成神经元样细胞。2.缺氧/复氧降低分化后PC12细胞活性,NAC和雷帕霉素显著抑制缺氧/复氧所致细胞活性的下降。3.缺氧/复氧诱导分化后PC12细胞凋亡,NAC和雷帕霉素显著抑制缺氧/复氧所致的细胞凋亡。4.缺氧/复氧增加分化后PC12细胞内ROS水平,NAC显著抑制缺氧/复氧所致细胞内ROS水平的增加,雷帕霉素对细胞内ROS水平无明显影响。5.缺氧/复氧增加分化后PC12细胞p-p70S6K (Thr389)的表达,NAC和雷帕霉素显著抑制缺氧/复氧所致细胞p-p70S6K (Thr389)表达的增加。结论1.缺氧/复氧可能通过升高细胞内ROS水平,进而激活mTOR/p70S6K信号通路,诱导分化后PC12细胞凋亡2.NAC和雷帕霉素能抑制mTOR/p70S6K信号通路,降低mTOR通路相关信号蛋白(p-p70S6K)的水平表达,减少分化后PC12细胞凋亡。