精元康胶囊对化疗致骨髓抑制小鼠外周血象及骨髓有核细胞中p53蛋白含量的影响

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目的:通过观察精元康胶囊对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)致骨髓抑制小鼠外周血中红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板计数及骨髓有核细胞中p53蛋白含量的影响,探讨精元康胶囊对化疗药物致骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的影响及其作用机制,为精元康胶囊治疗化疗致骨髓抑制提供可靠的科学依据。方法:选用清洁级健康雄性BALB/C小鼠70只,鼠龄6~8w,体重18~22g,自由喂养3d后将小鼠称重、编号,按随机数字表法将小鼠随机分为7组:正常组、模型组、精元康胶囊高剂量组、精元康胶囊中剂量组、精元康胶囊低剂量组、贞芪扶正胶囊组、利可君片组。各组小鼠自由饮食喂养。各药物组第1~3天每天上午按小鼠体重10ml/kg腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液(10mg·ml-1),正常组小鼠按同样的体积质量分数腹腔注射生理盐水;正常组和模型组第1~7天每天下午按小鼠体重20ml·kg-1灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(Carboxymethyl cellulose sodium,CMC-Na)溶液,各药物组小鼠每天下午按同样的体积质量分数灌胃相应的药物混悬液:精元康胶囊高、中、低剂量组小鼠分别灌胃4g·20ml-1、3g·20ml-1、2g·20ml-1的精元康混悬液,贞芪扶正胶囊组灌胃3g·20ml-1的贞芪扶正混悬液,利可君片组灌胃1.6g/L的利可君混悬液。末次给药24h后行小鼠摘眼球取血,用全自动血细胞分析仪检测小鼠外周血血常规,记录白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白的数量。将取过血的小鼠用颈椎脱臼法处死,取右侧股骨,用生理盐水冲出骨髓细胞,制备骨髓单细胞悬液。将制备好的骨髓单细胞悬液离心后,取沉淀物,用预冷的磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered saline,PBS)洗涤1min×3次,在冰上向沉淀物中加入细胞裂解液将细胞全部裂解,用移液器将细胞碎片和裂解液移至离心管中,离心,取上清液,采用蛋白质印迹法(Western Blot)测定小鼠骨髓有核细胞中p53蛋白的含量。结果:(1)模型组小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板数值较正常组明显降低,各药物组小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板的数值较模型组明显升高,但以精元康胶囊高剂量组的效果最为明显,精元康中剂量组的效果次之,表明一定剂量的精元康胶囊能在一定程度上促进化疗后骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的恢复。(2)模型组小鼠骨髓有核细胞中p53蛋白的含量较正常组明显升高,各药物组小鼠骨髓有核细胞中p53蛋白的含量较模型组均有一定程度的降低。各药物组中精元康胶囊高剂量组小鼠骨髓有核细胞中p53蛋白的含量低于其它各组,精元康中剂量组降低p53蛋白含量的作用次之。本课题研究结果表明精元康胶囊灌胃给药能促进骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的恢复,降低骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞中p53蛋白的含量,且其作用效果与药物剂量呈正相关。结论:精元康胶囊能明显改善环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制现象,显著增加骨髓抑制小鼠外周血红细胞、白细胞、血红蛋白及血小板数,且能明显降低小鼠骨髓有核细胞中促凋亡蛋白p53蛋白的含量,证实精元康胶囊能够改善化疗所导致的骨髓抑制现象、恢复骨髓造血功能的作用机制可能与精元康胶囊能够抑制骨髓有核细胞的凋亡有关。
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