【摘 要】
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目的:溶瘤腺病毒对不同膀胱癌细胞的杀伤作用各不相同,本研究通过蛋白组学的方法找出可能导致这种差异的蛋白因素,为后续研究如何提高膀胱癌细胞对溶瘤腺病毒的敏感性提供理论
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目的:溶瘤腺病毒对不同膀胱癌细胞的杀伤作用各不相同,本研究通过蛋白组学的方法找出可能导致这种差异的蛋白因素,为后续研究如何提高膀胱癌细胞对溶瘤腺病毒的敏感性提供理论依据。方法:(1)通过流式细胞术检测膀胱癌细胞EJ、T-24、BIU-87经过腺病毒Ad-PSCAE-UPⅡ-E1A-AR处理72小时后凋亡率,并比较其差异。(2)收集足量的人工培养的膀胱癌细胞EJ、T-24、BIU-87,提取其细胞总蛋白,使用双向凝胶电泳将提取的蛋白分离,染色,GS-800扫描图像,PDQuest7.0软件分析图像找出其中差异蛋白,然后质谱检测鉴定出蛋白的种类。结果:腺病毒Ad-PSCAE-UPⅡ-E1A-AR作用于细胞72小时后,细胞凋亡率EJ>BIU-87>T-24o通过双向凝胶电泳,我们成功的得到了重复性较好的凝胶图像。通过软件对凝胶的匹配分析,找出了3组凝胶之间的差异蛋白,经过质谱鉴定,这些差异蛋白中在EJ、BIU-87、T-24中表达量逐渐增加的是:钙腔蛋白、磷酸化p-肌动蛋白、SRSF1蛋白、异质性核糖核蛋白hnRNPA2、异质性核糖核蛋白L、人内质网蛋白29、缺氧诱导蛋白HIGl抗体、谷氨酸脱氢酶1、亲环蛋白PPIA、半乳糖凝集素1、人氧还原蛋白过氧化物酶4和组蛋白H2B1C。在EJ、BIU-87、T-24中表达量依次降低的点鉴定出来蛋白是:亮氨酸氨基肽酶3、有丝分裂蛋白BUB3。结论:腺病毒Ad-PSCAE-UPⅡ-E1A-AR能够有杀伤膀胱癌细胞EJ、BIU-87、 T-24。通过双向电泳成功的找出了可能影响膀胱癌细胞对溶瘤病毒敏感性的差异蛋白。
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