花生粕制备生化试剂蛋白胨的工艺研究

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论文分别采用木瓜蛋白酶酶解冷榨花生粕和微生物发酵热榨花生粕制备两种花生蛋白胨,以蛋白胨得率和氨基氮含量为考察指标,通过单因素试验和正交试验对工艺条件进行优化,从而制备生化试剂花生蛋白胨。旨在为今后深入研究酶解花生粕专用微生物培养基料产品提供理论和试验基础。本文的主要研究内容与结论如下:1.冷榨和热榨花生粕原料分析。分别对冷榨和热榨花生粕的蛋白质,脂肪,灰分,总糖,水分含量进行分析。冷榨花生粕原料中蛋白质含量高达56.36%,脂肪的含量较低为1.23%,水分和灰分含量分别为7.83%和5.52%,另外花生粕中糖的含量较高为25.67%。热榨花生粕原料中蛋白质含量达48.87%,脂肪的含量较低为1.16%。水分和灰分含量分别为7.58%和8.42%,另外花生粕中糖的含量较高为23.89%。两种原料均不需脱脂处理。2.采用木瓜蛋白酶酶解冷榨花生粕制备蛋白胨。研究了酶解温度、pH、底物浓度、酶解时间和加酶量对蛋白胨得率和氨基氮含量的影响。运用单因素和正交试验方法对木瓜蛋白酶制备花生蛋白胨工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:酶解温度55℃,pH7.5,底物浓度2%,加酶量6%,酶解时间6小时。此工艺条件下制备蛋白胨的得率为48.34%,氨基氮的含量为0.726mg%。3.通过微生物发酵法发酵热榨花生粕制备蛋白胨。根据枯草芽孢杆菌菌体可以自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类的特点来酶解花生粕中蛋白质,从而得到蛋白胨产品。主要分为发酵和酶解两步进行。发酵试验中选取发酵温度、发酵时间、接菌量、料水比进行单因素试验,根据单因素试验结果进行正交试验。选取最佳的发酵条件进行酶解试验。酶解试验中选取加水量、酶解温度、酶解时间进行单因素试验,根据单因素试验结果进行正交试验,优化蛋白胨生产工艺。结果表明:发酵温度为35℃,发酵时间为60h,接菌量为4mL,料水比为2:1,加水量为200mL,酶解温度为60℃,酶解时间为1.5h,得到最好的蛋白胨生产工艺。在此工艺下制备的蛋白胨的得率在39.58%,氨基氮的含量为0.7112mg%。4.两种蛋白胨产品的理化性质检验。主要包括对一般特性如:颜色、澄清度、沉淀等的检测和对总氮含量、氨基氮含量等的测定。两种蛋白胨的总氮含量和氨基氮含量符合国家标准。冷榨蛋白胨水溶液颜色微黄、澄清透明、无沉淀、碱性沉淀和磷酸盐沉淀微量。热榨蛋白胨水溶液颜色浅棕色、透明澄清、无碱性沉淀和磷酸盐沉淀。
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