5-Fu对胃癌细胞中转录因子OCT4和SOX2表达的影响

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目的:①研究不同浓度化疗药物5-Fu对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响,并计算其半数抑制浓度(IC50)。②观察半数抑制浓度(IC50)5-Fu作用不同时间后对胃癌细胞株SGC-7901中转录因子OCT4和SOX2蛋白及mRNA表达水平的变化的影响,探讨其变化与癌干细胞的关系。方法:应用MTT法绘制细胞生长曲线,并计算其半数抑制浓度(IC50);细胞免疫组织化学方法检测半数抑制浓度(IC50)5-Fu作用12h、24h、48h后胃癌细胞株SGC-7901中转录因子OCT4和SOX2蛋白表达水平的变化;RT-PCR检测半数抑制浓度(IC50)5-Fu作用12h、24h、48h后胃癌细胞株SGC-7901中转录因子OCT4和SOX2基因mRNA表达水平的变化。结果:细胞生长曲线实验结果示5-Fu能明显抑制胃癌细胞株SGC-7901增殖,半数抑制浓度(IC50)约为60μM;细胞免疫组织化学实验结果示半数抑制浓度(IC50)5-Fu作用12h、24h、48h后OCT4和SOX2平均光密度值(AOD),与对照组比较(P<0.05);RT-PCR实验结果示半数抑制浓度(IC50)5-Fu作用12h、24h后胃癌细胞株SGC-7901中转录因子OCT4和SOX2基因表达丰度量(F),与对照组比较(P<0.01)。作用48小时后,与对照组比较(P<0.05);结论:1、OCT4和SOX2在胃癌细胞株SGC7901中的表达阳性,提示胃癌细胞株SGC7901中可能存在具有自我更新和分化潜能的癌干细胞样细胞。2、SGC7901细胞在5-Fu作用下,大量的S期细胞被杀灭,此时残余的Go期细胞比例增加,提示残余的Go期细胞中可能存在OCT4和SOX2表达阳性的癌干细胞样细胞。
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