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小麦条锈病是小麦上最重要的流行性病害。越冬是小麦条锈病周年循环的关键阶段,越冬菌源量决定着翌年条锈病的春季流行程度。小麦条锈菌越冬受秋苗菌源量、小麦品种抗冻性和气候条件等因素的影响。本研究基于real-time RT-PCR技术,对条锈菌潜育越冬部位、低温和品种抗冻性对条锈菌存活的影响,以及条锈菌越冬对返青期小麦条锈病发生情况的影响进行了系统深入的研究。取得以下主要结果:1.开发出了快速、高效、稳定的小麦条锈菌夏孢子及小麦叶片中条锈菌菌丝体RNA提取方法。该方法解决了条锈菌夏孢子RNA在提取过程中由于飞溅和粘附在容器上导致原始材料损失的问题。2.构建了绝对定量潜育叶片中活体条锈菌的real-time RT-PCR方法。基于DNA和RNA水平的real-time PCR方法均可检测潜育叶片中条锈菌量,但在潜育期以后有条锈菌死亡时,DNA水平的定量由于不能区分活体和死体条锈菌导致检测结果偏高,RNA水平的定量可真实反映活体条锈菌量从而也可用于潜育期以后叶片中条锈菌量的检测。3.条锈菌存活率在离体和活体叶片中均随处理时间的延长而降低,且在离体叶片中的存活率低于活体叶片中的。低温可以杀死潜育叶片中的条锈菌菌丝体,在-10°C持续48 h和-15°C持续30 h时,条锈菌在离体和活体叶片中均不能存活,在-20°C持续24 h时在离体叶片中不能存活,持续30 h时在活体叶片中不能存活。条锈菌在温度变幅为8°C的存活率显著高于温度变幅为13°C的,且这种趋势随着平均温度(0、-5和-10°C)的升高而显著。4.条锈菌存活率随着品种抗冻性的增强而升高(在0°C和-5°C下)。但在-10,-15和-20°C下,条锈菌存活率在不同抗冻性小麦品种中无显著差异。5.小麦条锈菌在叶片和叶鞘内均可越冬,在高海拔地区以叶鞘越冬为主,在低海拔地区以叶片越冬为主。在低海拔地区有外叶的情况下提高了条锈菌的越冬率,而在高海拔地区有无外叶对条锈菌越冬无差别。6.建立了返青期小麦条锈病发病株率的预测模型:y=8.174 +0.363x-0.486w+1.280t+0.182t-0.089d式中,x1为冬前小麦条锈病发病株率;w为小麦品种抗冻性;t为12月~1月当地县气象站的日平均温度;d为12月~1月的日平均温度≤-5°C的持续天数的等级;y为返青期小麦条锈病发病株率。