甜菜夜蛾肠粘蛋白SeIIM8生化特性及RNAi沉默基因分析

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fangduohui129
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hü bner)),又名白菜褐夜蛾,玉米叶夜蛾,属鳞翅目夜蛾科,是一种世界性的多食性、暴食性害虫,防治较为困难。围食膜(Peritrophic membrane,PM)作为昆虫天然的物j里屏障,具有避免微生物侵染,隔离并过滤毒素等作用。破坏围食膜就可能使昆虫因:处于不正常的生理状态而最终导致其死亡。昆虫中肠围食膜上大量的糖基化位点可能充当了病原物的吸附位点而阻止病原物同上皮细胞结合,而这些糖基化位点大都位于昆虫肠粘蛋白IIM(insect intestinal mucin)上。因此,可以将昆虫IIM作为害虫防治的潜在靶标位点,通过影响IIM正常结构及功能从而破坏昆虫中肠围食膜,以达到防治害虫的目的。   本研究以甜菜夜蛾中肠围食膜肠粘蛋白SeIIM8为研究对象,利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统成功构建基因seiim8的重组载体Bac-iim8,感染昆虫细胞系BTI-TN-581-4(High Five)并成功表达重组蛋白。Western blot检测表明,表达的重组蛋白分子量约为120kDa。ExPASy Proteomice Server进行SeIIM8蛋白结构域分析,发现其含有6个几丁质结合功能域(CBD),1个粘蛋白结构域(MD),1个天冬氨酸-赖氨酸富集区(DKD)和7个TQAPTT重复。   从甜菜夜蛾围食膜蛋白总抗体中成功分离得到SeIIM8的特异抗体,利用此特异抗体检测重组蛋白的几丁质结合活性,发现SeIIM8具有较强的几丁质结合活性;利用1%Calcofluor,6 M urea,2%SDS+5%β-mercaptoethanol,50 mM冰乙酸,PBS洗脱与几丁质结合的肠粘蛋白,发现1%Calcofluor,6 M urea等强变性剂对SeIIM8蛋白的洗脱能力强。   RNAi作为研究基因功能的一种:有效技术已经被广泛应用。本研究根据seiim8基因序列,体外合成特异性的dsRNA,并注射到昆虫幼体血腔中,发现seiim8基因的表达可能受到了抑制。
其他文献
目的:探讨循证护理在脑梗死护理中的应用效果.方法:回顾分析笔者所在医院收治的68例脑梗死患者的临床资料,观察组给予循证护理,对照组给予常规护理.结果:实验组的满意度更好,
食管癌在临床上具有比较高的发病率,因其前期没有明显的临床表现,所以患者在确诊为食管癌时已经处于中晚期,此时患者已不能再进行手术治疗,所以临床上一般采用放化疗的方法来
本研究在纯化和保持室内高抗转Bt基因棉棉铃虫品系的基础上,采用F1代法进行了田间棉铃虫对转Bt基因棉的抗性等位基因频率的监测,并监测了四省转基因棉田棉铃虫种群对甲氨基阿
目的:调查我院35岁以下临床护士的职业生涯规划情况.方法:对我院120名临床护士进行职业生涯规划的问卷调查,均在35岁以下,分析调查结果.结果:120名被调查护士总分平均值(49.5
栗真绥螨(Euseius castaneau)是植绥螨科真绥螨属的一种最新研究的捕食螨种类,根据室内的初步研究发现,该捕食螨对入侵性害虫——西方花蓟马有一定的控制能力,是一种具有开发
目的:分析食管胃底静脉曲张破裂出血患者奥曲肽滴注治疗中专项护理干预的应用效果.方法:选取我院2017年9月—2018年9月收治的62例食管胃底静脉曲张破裂出血患者作为研究对象,
二斑叶螨和烟粉虱是重要的农林害虫,为找到一种合适的生物源农药防治二斑叶螨和烟粉虱,本试验选取百部、半夏、乌头、白屈菜、蛇床子、紫丁香和白头翁7种不同的中药材,用乙醇
医院后勤物资采购管理是医院管理中重要的组成部分,物资采购管理的水平充分体现了医院的整体管理水平,也是医院党风廉政建设的重要体现,规范医院后勤物资采购管理至关重要.
目的:探讨在老年心血管疾病治疗过程中加强心理护理的重要作用.方法:选取35例采取非手术治疗老年心血管疾病患者在常规治疗护理的同时增强心理疏导、人文关怀.结果:治疗后35
目的:对消化道出血患者的临床观察及护理要点分析;方法:选取2017年12月—2018年3月与我院进行治疗的68例消化道出血患者作为本次研究对象.选用随机数法将68例患者分为观察组