中华芦荟(Aloe vera L. var. chinensis (Haw.) Berger)无性系的离体快速繁殖技术及对水分胁迫的适应性研究

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本试验以中华芦荟(Aloe vera L. var. chinensis(Haw.)Berger)为材料,研究了中华芦荟无性系的离体快速繁殖;并在此基础上成功地快速繁殖了库拉索芦荟(Aloe Vera L.)、木立芦荟(Aloe arborescens Mill.)、皂质芦荟(Aloe saponria(Ait.)Haw.);同时通过人工水分胁迫处理,研究了中华芦荟的抗旱生理生化指标、生物量和药用成分的变化,对中华芦荟在水分胁迫条件下的适应机理进行了探讨。 根据前期的工作经验,以MS培养基为基本培养基,选取6-BA、NAA和蔗糖这3个因子,每个因子取3个水平。选用L9(34)正交表,考察上面三个因素对中华芦荟丛生芽诱导的影响。筛选到中华芦荟丛生芽诱导的最优培养基为:MS+2.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+30g/L蔗糖。用筛选出的最优培养基进行验证实验,中华芦荟丛生芽诱导既快又多,年繁殖系数可达1512以上,为目前国内中华芦荟无性系快速克隆繁殖的最高水平;而且在这种培养基中,丛生芽的生长也很正常。 以1/2 MS培养基为基本培养基,选取NAA、IBA、蔗糖和抗氧化剂PVP这4个因子,每个因子取3个水平,选用L9(34)正交表,考察上面四个因素对中华芦荟丛生芽生根的影响。筛选到中华芦荟丛生芽生根的最优培养基是:1/2 MS+0.5% PVP+0.2mg/L NAA+0.2mg/L IBA+30g/L蔗糖。用筛选出的最优培养基进行验证实验,中华芦荟丛生芽生根既快又多。10天左右即可生根,且根系生长发育较自然条件下好,而且在这种培养基中,丛生芽的生长也很正常。 中华芦蔓无性系的离体快速拄殖技术及对水分胁迫的适应性研究 得到的快繁幼苗十分健壮,移栽后很容易,存活达97%。 在中华芦苔快速繁殖的基础上,成功繁殖了库拉索芦苔、木立芦苔、皂质 芦苔的试管茵;最后,用筛选到的两个培养基进行了中华芦苔试管苗的大规模 繁殖取得成功。 在干旱逆境下,中华芦苔的生物量降低;而药用成分芦苔多糖和芦苔贰的 变化截然不同。芦苔多糖表现为单位鲜重叶片中的含量随土壤含水量的减少而 下降,单位干重叶片中芦苔贰含量却增加。这说明在逆境条件下,中华芦苔初 生代谢受到抑制,从而导致生物量和芦苔多糖含量的下降;次生代谢增强,芦 苔贰的合成加强使芦苔戌含量增加;但是由于生物量的减少速率大于芦苔贰的 增加速率使芦苔贰的产率降低。土壤干旱使中华芦苔叶绿素含量下降,Hill 反 应活力下降,气孔阻力变大,蒸腾速率降低,CO。固定速率降低,同化产物积累 减少,这是导致中华芦姿的生物量和经济产量减少的主要原因。 人工模拟土壤干旱条件下,中华芦苔对水分胁迫的适匝能力及影响生物量 指标的研究结果表明:在干旱条件下,中华芦苔叶片的长、宽、厚都减小,减 小了蒸腾面积;气孔频度降低,水分的散失减少,利于保水;根冠比变大,利 于叶片维持较高的自由水含量,以保证细胞内生理生化过程的顺利进行。这说 明中华芦苔在干旱条件下,能产生形态学的变化以适应干旱维持生存。在水分 胁迫下,中华芦苔叶片的含水量、叶片相对含水量和自由水/束缚水的值降低。 这主要是由于自由水含量的减少而致。中华芦苔具有一定的渗透调节能力。叶 片中作为细胞内渗透调节物质的游离脯氨酸、可溶性糖。K”等细胞内溶质含量 在水分胁迫下都有明显增加,均与土壤含水量呈负相关。但叶片相对含水量和 质膜相对透性下降表明渗透调节作用很有限。 在轻度水分胁迫下,中华芦苔叶片中的保护酶类500、POD、CAT的活性升 高,表明中华芦著在清除体内的活性氧,降低膜脂过氧化,稳定膜结构和功能 等方面,表现出对水分胁迫的适应性;但在中度水分胁迫下非酶促保护物质ASA 含量降低,SOD、POD、CAT的活性降低,导致活性氧产生和清除的平衡失调,0。·- 的积累迅速增加,膜脂过氧化加剧,MDA含量提高,从而降低了膜的稳定性, 最终导致膜伤害,这是水分胁迫下造成中华芦苔伤害的主要原因。 内源激素是植物体内的正负化学信号,调控着植物的多种生理生化过程。 随土壤含水量的减少,水分胁迫的加剧,植物内源激素ZRs和GA含量降低,ABA 2l且 H.H
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